刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究

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1、刺芒柄花素雌激素样作用及其与血脂相关性研究作者：幸奠霞刘志高薛存宽许明旺张芹熊亮杨琼芳【摘要】目的探讨刺芒柄花素对去势大鼠的雌激素样作用及其对血脂的影响。方法雌性大鼠40只，随机分为5组，即假手术组、模型组、尼尔雌醇组、刺芒柄花素低、高剂量组。去势成功后，予以高脂饮食，同时分别灌胃不同剂量的刺芒柄花素，并以尼尔雌醇和生理盐水作对照，连续用药8w，第8周前5d连续作阴道冲洗脱落细胞涂片。第8周末断头处死大鼠，取子宫并进行子宫指数的测定，同时取血作血脂测定。结果与模型组比较，高剂量刺芒柄花素组阴道细胞涂片可见动情周期变化，促使去势后萎缩的子宫指数回

2、升，子宫内膜增生，血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)降低，且这些作用弱于尼尔雌醇;而刺芒柄花素低剂量组无此变化。结论刺芒柄花素在体内具有雌激素样作用，能够改善高脂饮食大鼠的血脂紊乱。【关键词】刺芒柄花素;雌激素样作用;血脂8动脉粥样硬化(AS)所致心脑血管病变是威胁人类健康的首位疾病，雌激素对心脑血管的保护作用受到国内外学术界的关注。绝经后妇女应用激素替代疗法(HRT)能显著降低心脑血管疾病的发病率。然而，HRT所带来的不良后果如乳腺癌、子宫内膜癌〔1〕、静脉血栓〔2，3〕等，在一定程度上限制其推广应用并促使人们转而寻求更加

3、安全有效的雌激素替代品。植物雌激素是一类和雌二醇结构相似，具有弱雌激素样作用的非甾体样的植物成分，主要包含异黄酮、木酚素和香豆雌酚。红车轴草中含有鹰嘴豆芽素A、刺芒柄花素、染料木素和大豆黄素等多种异黄酮类植物雌激素〔4〕，刺芒柄花素和鹰嘴豆芽素A及其甙类占红车轴草总异黄酮的80%以上。本研究首次以刺芒柄花素灌胃去势后高脂食饵喂食的大鼠，初步观察提纯的刺芒柄花素在体内是否具有雌激素样效应，以及对大鼠血清脂质水平的影响。　　1材料与方法　　1.1主要药品、试剂及仪器　　1.1.1刺芒柄花素制备红车轴草经乙醇热回流提取，水解处理，活性氧化铝吸附后酸性

4、醋酸乙酯洗脱，再经硅胶柱层析分离，高效液相色谱分析刺芒柄花素含量为82%;尼尔雌醇：上海医药(集团)有限公司华联制药厂(批号060501)。　　1.1.2其他试剂与仪器丙硫氧嘧啶：上海复星朝晖药业有限公司(批号060901);胆固醇、胆盐：武汉亚法生物技术有限公司;蛋黄粉：浙江长兴艾格生物制品有限公司;猪油：武汉中百连锁仓储超市有限公司;AU400全自动生化分析仪：日本OLYMPUS公司。8　　1.2实验动物健康成年雌性SD大鼠40只，体重在150～200g之间，购于武汉大学实验动物中心,合格证号：SCXK(鄂)20032005。　　1.3

5、实验方法　　1.3.1造模及分组采取随机方法将大鼠分为5组，每组8只。第1组为假手术组，打开腹腔切除卵巢周围小块儿脂肪后关腹。后4组采取经背双侧卵巢切除术。术后第5～10天连续进行阴道冲洗细胞涂片，确定假手术组有正常动情周期变化而后4组无变化则为造模成功。第11天起，各组饲以高脂饮食(含猪油10%，蛋黄粉5%，胆固醇1.5%，胆盐0.2%，丙硫氧嘧啶0.2%)。与此同时，假手术组及模型组每日灌胃生理盐水1ml/100g，尼尔雌醇组每周一灌胃尼尔雌醇2.5mg/kg，刺芒柄花素低剂量及高剂量组每日分别灌胃刺芒柄花素20、100mg·kg-1·d-

6、1，连续8w。　　1.3.2取材第8周周一开始行阴道冲洗脱离细胞涂片，第8周末断头处死大鼠，取血0.2ml，待其自然凝固后采用全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL8C)含量。同时立即取出子宫并剥离周围结缔组织，称重后将标本置于10%甲醛中固定，石蜡包埋切片后进行HE染色，光镜下观察子宫内膜上皮变化。　　1.4统计学分析数据以x±s表示，采用SPSS14.0统计软件，用单因素方差分析进行多组均数比较，再用最小有意义差异法(LSD法)进行两两比较。　　2结果　　2

7、.1大鼠阴道细胞涂片假手术组和尼尔雌醇组呈现正常的动情周期变化，可见动情期大量无核角化上皮细胞;模型组及刺芒柄花素低剂量组无动情周期变化，表现为动情间期的大量白细胞。刺芒柄花素高剂量组亦可见动情期变化，镜下见无核角化上皮，且互相融合。见图1。　　2.2各组子宫系数比较按照公式子宫系数=子宫重量/体重(g/kg)各组大鼠子宫指数的均值比较中，假手术组最高，尼尔雌醇组和刺芒柄花素高剂量组其次，刺芒柄花素低剂量组和模型组最低。模型组与假手术组子宫指数比较，差异有统计学意义(P<0.01);尼尔雌醇组子宫指数较模型组明显升高(P<0.01)

8、，与假手术组差异无统计学意义(P>0.05);低剂量刺芒柄花素使子宫指数有所提高，但与模型组比较，差异无统计学意义(P>0.05);高剂量