三种肺炎支原体血清学检测方法比较

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1、三种肺炎支原体血清学检测方法比较【关键词】肺炎支原体【摘要】目的通过微量颗粒凝集法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法及冷凝集试验(CAT)对呼吸道感染患儿血清肺炎支原体(MP)的检测,评估三种方法的应用价值。方法对216例呼吸道患儿同时作冷凝集试验及颗粒凝集法、ELISA法检测其肺炎支原体的抗体IgM。结果在172例临床诊断为MP感染的患儿中,颗粒凝集法阳性160例,敏感性93.0%,ELISA法阳性164例,敏感性95.3%,CAT阳性116例,敏感性67.4%。结论颗粒凝集法与ELISA法敏感性较高,特异性较强,而CAT较差。关键词肺炎支原体血清特异性抗体I

2、gM冷凝集试验肺炎支原体(Myocoplasimapneumonia,MP)是急性呼吸道感染的常见病原体之一。近年来,已成为小儿肺炎常见的病原体[1],由其引起的呼吸感染日趋增多[2]。目前,实验室诊断方法主要依靠血清学。我们对2002年9月~2003年4月分院收治住院的呼吸道感染患儿进行微量颗粒凝集法(PA)和酶联免疫吸附法(ELISA)进行肺炎支原体抗体IgM的测试,并且同时检测冷凝集试验,现报告如下。1材料与方法1.1对象标本来源2002年10月~2003年4月就诊的呼吸道感染症状的分院儿科病房呼吸道感染患者216例。每例均于入院2天内抽血,。同时用间接血

3、凝法和酶联免疫法检测MP-IgM抗体及冷凝集试验。1.2方法41.2.1微量颗粒凝集法(PA)测MP-IgM抗体,试剂盒SERODIASMYCO-H由FUJIREBIOINC提供。严格按说明书进行操作,每次均设阴、阳性对照,滴度≥1:80为阳性。1.2.2ELISA法试剂由美国诊断自动化公司生产,上海领检科技公司提供,操作严格按说明书进行。1.2.3冷凝集试验(CAT)按《临床医学检验》“冷凝集试验”进行操作,滴度≥1:64为阳性。2结果2.1治疗结果216例受检样品中,MP感染和非MP感染患儿MP三种结果比较见表1。172例疑为MP感染的病例中,PA法阳性占9

4、3.0%,ELISA法占95.3%,CAT法占67.4%。在44例非MP感染中,PA法阳性占9.0%,ELISA法占11.3%,CAT法占13.6%。表1MP感染和非MP感染患儿MP三种结果比较略2.2PA法、ELISA法、CAT三种检测方法比较PA法敏感性93.0%,特异性90.9%,ELISA法敏感性95.3%,特异性88.6%,冷凝集试验敏感性67.4%,特异性86.3%。3讨论小儿肺炎支原体感染的临床表现多种多样,可引起全身各脏器损害,但以呼吸道感染最为多见[3]4。随着检测技术的提高,检出MP感染发病率明显增高,已受到人们的关注。目前,支原体肺炎的实验

5、室诊断方法有支原体分离培养、特异性抗体检测、冷凝集试验及PCR等[4]。其中,这些试验中最为可靠的方法是取呼吸道分泌物做支原体培养,培养基上见煎蛋状菌落生长,即可确诊。但所需时间长,阳性率低,临床上不能快速诊断。PCR方法特异高,但需昂贵设备,不易普及。冷凝集试验虽然方法简单、易行,长期被认为诊断肺炎支原体的传统方法,但其敏感性和特异性均较差,是一种非特异方法,本文敏感性为67.4%,漏诊率较高,抗MP-IgM抗体是机体受MP感染最早出现的抗体,于发病1周左右开始升高,这对于1周的病程易造成漏诊。ELISA法检测MP-IgM敏感性和特异性分别为95.3%和88.

6、6%,敏感性和特异性与微量颗粒凝集法接近,且重复性好,但操作较繁琐,且需要酶标仪等。颗粒凝集法用日本富士提供的试剂盒,运用表面吸附支原体抗原的明胶颗粒代替动物红细胞,消除了非特异性反应,且3h即能出报告。灵敏度和特异性分别为93.0%和90.0%,无需特殊仪器设备,即可操作,可作为支原体肺炎实验室诊断的常规检测,以利于早期做出诊断。参考文献1DavisSF.ConcurrentoutbreaksofpertussisandMycoplasmapneumoniainfection.ClinInfectDis,1995,20:621.2王学枋,王晓红,赵国吕.小儿肺

7、炎支原体96例临床分析.上海医科大学学报,19997,24(6):523.3张蓓,余晓刚,沈立崧.小儿肺炎支原体感染的血清学检测及临床应用.上海医学检验杂志,2001,16:35-36.44刘东旭.肺炎支原体感染检测诊断技术究近况.国外医学・内科学分册,1994,21(2):50-53.4

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