β1,4-galt i在大鼠坐骨神经损伤后脊髓和背根神经节中的表达

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1、β1,4-GalTI在大鼠坐骨神经损伤后脊髓和背根神经节中的表达【摘要】目的:观察β1,4-GalTImRNA在坐骨神经损伤后相应节段脊髓和背根神经节中的表达变化。方法:采用real-timePCR方法,分析β1,4-GalTImRNA在大鼠坐骨神经损伤后相应脊髓和背根神经节中的表达变化。运用原位杂交检测β1,4-GalTI在脊髓和背根神经节中的定位情况。结果:Real-timePCR显示,与正常脊髓和背根神经节相比,β1,4-GalTI在坐骨神经损伤后发生表达变化。原位杂交结果显示β1,4-GalTI在正常脊髓中的表达较弱,主要表达于

2、脊髓灰质中,而损伤后在灰质和白质中均可见有大量的阳性信号。β1,4-GalTI在背根神经节中则主要定位于神经元。结论:本实验发现β1,4-GalTI在正常脊髓和背根神经节中有表达,并在坐骨神经损伤后发生表达变化。提示β1,4-GalTI在周围神经损伤后再生和退变过程中可能发挥一定的作用。【关键词】坐骨神经损伤;β1,4-GalTI;实时定量聚合酶链反应;原位杂交;脊髓;背根神经节;大鼠[Abstract]Objective:Toobservetheexpressivechangesofβ1,4-GalTImRNAincorrespond

3、ingspinalcordanddorsalrootganglionaftersciaticnerveinjury.Methods:Real-timePCRwasusedtodetecttheexpressivechangesofβ1,4-GalTImRNAin10correspondingspinalcordanddorsalrootganglionaftersciaticnerveinjury.Thelocalizationofβ1,4-GalTImRNAincorrespondingspinalcordanddorsalrootg

4、anglionwasexploredbyusinginsituhybridization.Results:Real-timePCRrevealedthat,comparedwiththenormalcontrolgroup,theexpressivelevelsvariedaftersciaticnerveinjury.Insituhybridizationshowedthattheexpressionofβ1,4-GalTIinnormalspinalcordwasweakandmainlylocatedinthegreymatter

5、ofspinalcord,andtheexpressionsignalswereenhancedinspinalcordaftersciaticnerveinjuryanddistributedinthegreyandthewhitematter.β1,4-GalTImainlylocatedinneuronsindorsalrootganglion.Conclusion:β1,4-GalTIispresentinnormalspinalcordanddorsalrootganglion,anditvariesaftersciaticn

6、erveinjury.Theseresultsindicatethatβ1,4-GalTImayplayrolesinperipheralnerveregenerationanddegenerationafternerveinjury.[Keywords]Sciaticnerveinjury;β1,4-GalTI;Real-timepolymerasechainreactin;Insituhybridization;Spinalcord;Dorsalrootganglion;Rat10机体中具有重要生理和病理作用的糖复合物是指含糖链的生

7、物大分子,包括糖蛋白、糖脂、蛋白多糖和杂多糖等。糖基转移酶主要存在于内质网和高尔基体中,将翻译的蛋白质加工成成熟的糖蛋白。半乳糖基转移酶属于糖基转移酶这一大家族中的一个亚类,它们都以UDP-半乳糖苷为糖基供体。β-1,4-GalTI是最早被克隆的一种糖基转移酶,为单链跨膜Ⅱ型膜糖蛋白[1]。除在高尔基体合成糖苷键的功能外,还表达在细胞膜上,通过结合毗邻细胞质膜上或细胞间质中的糖复合物末端的N-乙酰氨基葡萄糖或半乳糖基而发挥细胞黏附作用[2]。已有研究发现,β-1,4-GalTI在损伤后坐骨神经中发生表达变化,主要表达于施万细胞中[3-4

8、],但对坐骨神经损伤后相应节段脊髓及背根神经节中β1,4-GalTI的研究尚未见有报道。本课题主要观察β1,4-GalTImRNA坐骨神经损伤后相应节段脊髓和背根神经节中的表达变化,进一步探讨β1,4-Ga

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