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时间:2018-08-01
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1、KCNE2蛋白在自发性高血压大鼠心脏组织中的分布和表达作者:王慧莲,吕社民,宁启兰,韩燕,杨旭东,钟波【摘要】目的研究KCNE2蛋白在自发性高血压大鼠(SHR)心脏不同部位的分布和表达差异,及鼠龄对其表达水平的影响。方法提取幼龄和高龄SHR心肌不同部位(心室、室隔膜和心房)组织的膜蛋白,利用Western印迹技术和图象分析方法,比较KCNE2蛋白在样品之间免疫强度差异。结果SHR心肌不同部位组织中均有KCNE2蛋白的分布;同龄大鼠心肌不同部位组织中KCNE2蛋白的表达均无显著性差异;但在高龄大鼠的右心室和室隔膜组织中,KCNE2蛋白的表达显著高于其在幼龄
2、大鼠相同组织中的表达。结论KCNE2蛋白在SHR心脏不同部位均有分布;在高龄大鼠右心室和室隔膜组织中,KCNE2蛋白的表达水平均高于其在幼龄大鼠同一组织中的表达。【关键词】KCNE2;自发性高血压大鼠;Western印迹法 ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatethedistributionandexpressionofKCNE2indifferentpartsofmyocardiumofspontaneouslyhypertensiverats(SHR)andcomparedifferencesofKCNEexpression
3、incardiacmusclebetweenyoungandoldSHR.MethodsFirstmembraneproteinswerepreparedfromright11ventricularmyocardium(RV),interventricularseptum,leftventricularmyocardium(LV)andatrialmyocardiumfromyoungandoldSHR,respectively.ThenthemembraneproteinswereseparatedbySDSPAGE,transferredtopol
4、yscreenPVDFmembrane,probedwithaprimaryantiKCNE2(polyclonalAb),andvisualizedwithECLdetectionkit.Imageswereacquiredandanalyzedwithrelatedsoftware.ResultsKCNE2proteinwasfoundtodistributeinalldifferentpartsofmyocardiumofSHRwithnosignificantdifferences.TheexpressionofKCNE2,however,in
5、rightventricularandinterventricularseptumofoldratswassignificantlyhigherthanthatofyoungrats.ConclusionKCNE2proteindistributesinalldifferentpartsofmyocardiumofSHR.TheexpressionofKCNE2inrightventricularandinterventricularseptumofoldratsissignificantlyhigherthanthatofyoungrats. KEY
6、WORDS:KCNE2;spontaneouslyhypertensiverat;Westernblot KCNE2蛋白也称MiRP1(minkrelatedprotein1)蛋白,是一个含有123个氨基酸、具有一个跨膜结构域的蛋白[1]。KCNE2蛋白是几个电压门离子通道的β亚基,可与多个离子通道的a11亚基如HERG通道、kv4.2通道、KCNQ1通道和超极化激活的阳离子通道相互作用,调节和影响着这些离子通道的功能[13]。KCNE2蛋白很可能是心脏电生理的一个重要的调控子[2],该亚基可以和HERG通道的α亚基或/和KCNQ1亚基联合聚集形
7、成传导IKr(快激活钾延迟整流电流)和/或IKs(慢激活钾延迟整流电流)的通道[45]。 自发性高血压大鼠(SHR)是高血压和心血管病研究的常用动物模型[67]。资料表明,心脏组织的细胞膜钾通道各亚基的分布和表达水平对心脏电生理的功能有一定的影响和调控作用[8]。目前尚未见有关KCNE2蛋白在SHR心脏各部位组织中的分布和表达方面的研究报道。本研究以幼龄和高龄SHR心脏为实验材料,旨在探讨KCNE2蛋白在SHR心脏不同部位的分布和表达情况以及鼠龄对其表达的影响。 1材料与方法 1.1材料SHR购于第四军医大学实验动物中心;抗KCNE2抗体(Ab
8、1)购于美国Alomone公司;蛋白质测定试剂盒购于BioRad公司;ECL检
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