c-erbb-2在乳腺癌中的表达及其与血管生成的关系

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1、C-erbB-2在乳腺癌中的表达及其与血管生成的关系【摘要】目的：探讨原癌基因C-erbB-2在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤微血管密度（MVD)之间的关系。方法：采用S-P免疫组化法检测215例乳腺癌组织中C-erbB-2基因蛋白表达和MVD值。结果：C-erbB-2的表达与肿瘤微血管密度密切相关，而且呈正相关关系（r=0.48,P<0.05)。结论：C-erbB-2在乳腺癌血管生成中起重要作用，C-erbB-2可作为判断肿瘤生物学行为及预后的指标。【关键词】乳腺癌；原癌基因C-erbB-2；血管生成；免疫组织化学　　AbstractObject

2、ive:TostudytheexpressionofProto-oncogeneC-erbB-2inthetissuesofbreastcancerandtofindoutitsrelationshipwithmicrovesseldensity(MVD).Methods:TheS-PimmunocytochemicalstainingwasusedtodeterminetheexpressionofC-erbB-2andMVD,respectively,in215casesofbreastcancer.Results:Therewascloselyr

3、elationshipsbetweentheexpressionofC-erbB-2andMVDinbreastcancer.Inaddition,therewasapositivecorrelationbetweenthem(r=0.48,P<0.05).Conclusion:TheoverexpressionofC-erbB-2playscrucialrolesinangiogenesis7inbreastcarcinomaandtheexpressionofC-erbB-2canbetakenasanindexforjudgingcarci

4、nomabiology,itsprognosisand,thus,aguidancetoclinicaltreatmentaswell.　　KeywordsBreastcarcinoma;Proto-oncogeneC-erbB-2;Angiogenesis;Immunocytochemistry　　原癌基因C-erbB-2(HER-2/neu)在多种上皮肿瘤，尤其是乳腺癌、卵巢癌、胃癌等多种癌症中扩增及过度表达，与患者预后密切相关[1-2]。实体肿瘤的生长和转移依赖于血管生成，而血管生成依赖于多种相关因子的诱导和调节，肿瘤血管生成是调节血管生成的正、

5、负性因子之间相互作用的结果，作为判断血管生成强度指标之一的微血管密度和血管生成正性调节因子之间呈显著的正相关性。因此，微血管密度（microvesseldensity，MVD）值可以反映血管生成强度。本研究采用免疫组化方法对乳腺癌组织C-erbB-2表达、MVD值进行相对定量观察，探讨C-erbB-2基因和乳腺癌血管生成之间的关系。　　1资料与方法　　1.1病例与标本7搜集1999年2月至2004年4月包头医学院第一附属医院手术治疗并经临床病理证实的原发性乳腺癌组织石蜡包埋标本215例，患者均为女性，年龄29～78岁，平均53.5岁。组织病理学均为浸润

6、性导管癌，所有病例均行根治性手术，术前未经抗癌治疗。　　1.2主要试剂链霉素抗生物素过氧化酶免疫组化染色超敏试剂盒（Ultrasensitive,S-Pkit)、CD34单克隆抗体、C-erbB-2单克隆抗体均购自福州迈新生物技术开发公司，所有抗体均为即用型；抗原修复缓冲液为0.01mol/L枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）。　　1.3方法本文所有组织均为石蜡包埋，做厚度为4μm的连续切片。免疫组织化学染色采用S-P法，DAB显色，免疫组织化学染色过程中以PBS代替一抗作阴性对照，用已知的CD34阳性、C-erbB-2阳性的乳腺癌组织切片做阳性对照。　　1

7、.3.1肿瘤内微血管计数与分级CD34抗体在乳腺癌间质血管内皮细胞（EC）的胞质内出现棕黄色颗粒为阳性，不着色为阴性，对照Weidner[3]报道的方法，在100倍光镜下挑选微血管分布最密区域，200倍视野下计数5个不重复视野中被CD34染成棕黄色的血管数目，取其均值作为MVD，依每个视野微血管密度不同将切片分为三级：Ⅰ级为0～50个，Ⅱ级为51～100个，Ⅲ级>100个。　　1.3.2C-erbB-2计数与分级7参照第四军医大学赵彤等免疫组织化学反应结果的判断标准，采用着色强度积分与数量积分相加的方法，C-erbB-2阳性物质定位于细胞膜。将阳

8、性细胞百分比分成五级：无阳性细胞为0分，阳性细胞≤25%者为1分，26%～50%为2分，51%