内镜下粘膜切除术治疗食管癌前病变的动态病理学观察

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1、内镜下粘膜切除术治疗食管癌前病变的动态病理学观察作者：魏子白　王丽冰　王金龙　肖鹏【摘要】目的:探讨预防食管癌的发生和发展的方法。方法:273例可疑食管癌患者经内镜下Lugol液染色，取黏膜不着色区组织进行p53蛋白免疫组化检测，并对p53蛋白表达阳性病灶，进行内镜下黏膜切除。结果:在85处重度不典型增生的黏膜内，p53蛋白阳性34处（40.0%），其中9处经内镜下黏膜切除术治疗，治愈1处（11.1%），好转5处（55.6%），总有效率为60.7%。对照组好转2处（8.0%），两组总有效率比较差

2、异有显著意义（P<0.01）。结论:内镜下黏膜切除术能有效切除食管癌前病灶，预防食管癌的发生和发展。【关键词】内镜检查;癌前状态/诊断;蛋白质p53/分析;染色法　我们曾对使用内镜下Lugol碘液染色和p53蛋白检测联合诊断食管早期癌和表浅癌的方法做了连续报道［1～3］。我们的研究结果表明，Lugol氏碘液染色和活组织p53蛋白检测不仅对诊断早期食管癌和判断有异型性改变的食管鳞状上皮细胞的恶性倾向有帮助，而且对应用内镜下黏膜切除术（endoscopicmucosalresection，EM

3、R）选择治疗重度不典型增生病灶有指导意义［4，5］8。但EMR治疗重度不典型增生病灶的最终疗效如何，国内外文献尚无报道，本研究旨在对这一问题做跟踪性观察和探讨。　　1对象和方法　　1.1对象选择1999年3月～2001年3月我院门诊或住院患者，符合下列条件之一者为研究对象:①有吞咽哽噎或异物感，内镜下食管粘膜无明显异常者;②内镜下食管黏膜广泛粗糙者;③内镜下食管黏膜有局限性充血、糜烂、斑块等可疑病灶者。共273例患者，年龄39岁～73岁，平均53.7岁，其中男181例，女92例。　　1.2方法　

4、　1.2.1Lugol碘液的配制:12g碘和24g碘化钾双蒸水稀释至1000mL，4℃冰箱保存待用。　　1.2.28Lugol碘液染色:常规内镜观察后，退至食管，将食管用50mL～100mL蒸馏水冲洗干净，使用HQ-WL胃镜染色专用喷雾管（购自上海安信实业有限公司）经胃镜活检孔插入至贲门，由下至上喷洒Lugol染液5mL～10mL，观察1min～2min内食管黏膜的颜色变化。Lugol染液能将正常黏膜均匀地染成棕褐色，有病变的黏膜呈现不染色区，在黏膜不染色区内多点取病理活检3块～5块后，用内镜注

5、射针在病灶的四周注射1∶10稀释的消毒墨汁对病灶进行标记。活检标本经10%福尔马林固定，石蜡包埋，连续切3张，厚度约4μm，一张行HE染色作病理诊断，另一张供免疫组化染色用。　　1.2.3病理诊断标准:根据Qiu［6］等的病理组织学诊断标准，对所取材的食管黏膜不染色区活检标本按正常黏膜、单纯性增生、轻度非典型增生、中度非典型增生、重度非典型增生、原位癌和鳞状细胞癌Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级作病理组织学诊断。　　1.2.4p53蛋白检测:免疫组化P53鼠抗人单克隆抗体（DO—7）及LSAB试剂盒为美国Cal

6、iforniaBiotechInc.产品。免疫组化（LSAB）操作步骤［1］。对照:PBS代替一抗作为阴性对照;已知的阳性组织切片同时同一条件下染色作为阳性对照。　　结果判断:p53以细胞核有明确棕黄色为阳性细胞。　　1.2.5内镜下食管黏膜切除术:对Lugol液染色出现黏膜不染色区，而该区域黏膜经内镜活检组织病理结果证实为重度不典型增生组织后，如再经p53蛋白检测阳性者行内镜下食管黏膜切除术，即在内镜下对经墨汁标记的食管黏膜病灶基底注射2mL～4mL生理盐水，使黏膜层与肌层分离，病变组织和周围

7、黏膜形成球形隆起，35mv电凝电流圈套器切除病灶，回收组织标本，并行连续切片，全瘤活检。8　　1.3分组分治疗组和对照组，治疗组为接受EMR手术的患者，共9例，对照组为未接受EMR手术的患者，共25例，两组间年龄、性别经统计学处理无显著性差异。　　1.4疗效判断标准治疗组和对照组均予以西沙比利5mg（西安杨森）、奥美拉唑20mg（无锡阿斯特拉）治疗4W。以术后6月黏膜活检的病理组织学结果为准，由术前重度不典型增生转变为正常黏膜、单纯性增生或轻度异性增生为治愈，由术前重度不典型增生转变为中度不典型

8、增生或仍为重度不典型增生，但p53蛋白检测为阴性者为好转，术前重度不典型增生仍为重度不典型增生但p53蛋白检测为阳性者为无变化，由术前重度不典型增生转变为原位癌或鳞状细胞癌者为恶化。治愈+好转=有效，无变化+恶化=无效。　　1.5统计学方法　　计量资料t检验和计数资料精确计算概率法。　　2结果8　　在273例患者中，发现109例患者存在127处不染色区，其中轻度不典型增生病灶11处，中度不典型增生病灶23处，重度不典型增生病灶85处，食管癌4处，在85处重度不典型增生的黏膜内，p53蛋白阳性34