两种不同检测方法测定血清钙离子的比较

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1、两种不同检测方法测定血清钙离子的比较【摘要】　　为了比较在宁夏彭阳县人民医院检验科实验室两种血清钙离子检测方法的分析性能，分别采用恒星科技公司HX-7185K/NA/CL/GA/PHAnalyzer分析仪的离子选择电极法(简称恒星)和上海爱诺电子有限公司MOL—300全自动生化分析仪及配套出品的甲基麝香草酚蓝比色法试剂盒(简称爱诺)进行测定，比较指标为不精密度、线性范围、抗干扰性、相关及偏倚。结果，血清钙离子浓度在0～3.95mmol/L时，两家分析仪在本实验室总的变异系数(CV)＜5%，检测线性范围为0～4.0mmol/L。血红蛋白＜10

2、g/L、胆红素＜300mg/L、维生素C＜5g/L，对两分析方法检测干扰＜10%，在可接受范围内。甘油三酯(TG)＜20mmol/L时恒星不受影响(干扰＜10%)。爱诺TG＞15mmol/L时低值血清干扰＞10%，高值血清不受干扰。50份血样进行相关分析的结果显示恒星和爱诺测定血清钙离子的相关性良好(r=0.98，P＜0.01)。恒星较爱诺测定血清钙离子结果偏低，平均偏倚为0.19，线性回归分析Cusum检验显示两种方法间偏移无统计学意义(P＞0.05)。实验室温度变化±5℃恒星测定血清钙离子结果不受影响而爱诺受温度影响较大，对同一份样本用

3、恒星与爱诺测定血清钙离子的最小至最大偏差范围为1.3%～20%，平均为4.1%。本实验室两种不同检测方法测定血清钙离子的精密度、线性范围、抗干扰性符合要求。【关键词】血清钙离子；离子选择电极法；比色法9　　宁夏彭阳县人民医院检验科实验室原有一台恒星科技公司HX-7185K/NA/CL/GA/PHAnalyzer分析仪，现又购买一台上海爱诺电子有限公司MOL—300全自动生化分析仪，这两种仪器均能检测血清钙，现将仪器及方法进行比较。　　1对象与方法　　1．1对象选择50份不同浓度水平的血清(其中包括高、中、低水平定值质控各两套)标本用于相关性

4、及偏倚分析，并收集高、中、低三个水平的血清钙混合，以1mL分装后-20℃储存，用于不精密度测定。　　1.2仪器与试剂恒星科技公司HX-7185K/NA/CL/GA/PHAnalyzer分析仪(定期自动定标)和上海爱诺电子有限公司MOL—300全自动生化分析仪及配套出品的甲基麝香草酚蓝比色法试剂盒(更换试剂批号时定标)，用于离子选择电极法配套校准品批号035911，035912，035913；用于MOL—300全自动生化分析仪及配套出品的甲基麝香草酚蓝比色法试剂盒的配套校准品，来源不详，浓度为0、0.79、1.78、2.37、3.16、3.9

5、5mmol/L。干扰物质为血红蛋白10g/L、胆红素300mg/L、维生素C95g/L、甘油三酯(TG)20mmol/L。　　1.3测定原理　　1.3.1离子选择电极法　　离子选择电极是一种化学传感器，它能将溶液中的某种离子的活度变成电位信号，然后通过仪器来测量。电极电位随溶液中离子活度变化的关系服从Nernst方程，选择电极的电位与溶液中被测离子活度的对数成线性关系。离子选择电极仪通常采用比较法来测定样本中的离子钙和pH值，即先测量两个已知浓度标准液中的离子钙和pH的电极电位，在仪器程序内建立一条斜率曲线，然后测量样本中的离子钙和pH的电

6、极电位，从建立的斜率曲线上求出样本中的离子钙和pH，并计算出标准化离子钙浓度。　　1.3.2甲基麝香草酚蓝比色法　　血清钙离子在碱性溶液中与甲基麝香草酚蓝结合，生成蓝色的络合物。加入适当的8-羟基喹啉，可消除镁离子对测定的干扰，与同样处理的钙标准液进行比较，以求得血清总钙的含量。　　1.4方法学评价9参考美国临床和实验室标准协会(clinicalandlaboratorystandardsinstitute，CLSI)评价方案对试剂、仪器的不精密度、线性、抗干扰性、相关性及偏倚进行评价。　　1.4.1不精密度　　参考EP5—A文件［1］，采

7、用两种方法对高、中、低三份混合血清，连续测定10d，每天测定两批，批间间隔的时间不小于2h，每批对样品做双份测定，取均值，计算批内、批间、天间及总不精密度。　　1.4.2线性实验　　取病人的异常高值血清1份［作为浓度CA1］和正常人血清一份［作为浓度CA5］，取等体积的CA1和CA5干扰混合构成浓度3(CA3)，取等体积的CA1和CA3混合构成浓度2(CA2)，取等体积的CA3和CA5混合构成浓度4(CA4)。5份标本随即排列测定，对每个样本做双测定。　　1.4.3干扰实验9　　在正常人血清中各加一定量的血红蛋白10g/L、胆红素300mg

8、/L、维生素C5g/L、TG20mmol/L，干扰物与混合血清按1∶9的比例混合。血红蛋白干扰浓度为：1、2、4、8、10g/L；胆红素干扰浓度为：50、100、200、300m