不同品种丹参中丹参酚酸b含量比较

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1、不同品种丹参中丹参酚酸B含量比较作者：孙磊，陈靖，王晶，张立明，权洪峰，张彩芳【摘要】目的建立丹参酚酸B的HPLC含量测定方法，比较不同品种丹参中丹参酚酸B含量。方法采用RP-HPLC方法测定丹参酚酸B含量。结果标准曲线方程y=981230x-342049(r=0.9990)，表明丹参酚酸B在11.96～29.9mg·mL-1线性良好，日内精密度小于1%，日间精密度小于2%，重现性试验RSD%为1.95%(n=3)，平均加样回收率为99.8%。测得不同品种丹参中丹参酚酸B含量分别为：红参3.92%(RSD=0.49%，n=3)，一窝团5.52%(RSD=0.49%，n=3)，系参7.64%

2、(RSD=0.49%，n=3)。结论RP-HPLC方法测定丹参酚酸B含量简便可靠，可做为微量样本丹参中丹参酚酸B含量的快速测定方法;不同品种丹参中丹参酚酸B含量差异较大，系参含量最高，比红参高了近2倍，具有较高的商业价值。【关键词】丹参;丹参酚酸B;HPLC　丹参为唇形科植物丹参(SalviamiltiorrhizaBge.)的干燥根及根茎，性微寒，味苦，具有活血化瘀、凉血、宁心等功效，主治月经不调、跌打损伤、经闭痛经等症[1]6。丹参一般使用方法为水煎，故水溶性成分应为丹参发挥疗效的主要成分，丹参酚酸B则是丹参中含量最高的水溶性成分[2-3]，因此丹参酚酸B含量可做为丹参质量的重要考察指

3、标之一。本论文采用RP-HPLC-UV方法，建立了微量样本中丹参酚酸B含量快速测定方法，并比较了三个丹参品种红参、一窝团、系参中丹参酚酸B的含量差异，为提高中药材种植质量提供借鉴。　　1材料与方法　　1.1主要试药　　乙腈、甲酸为色谱纯(天津康科德科技有限公司);提取用甲醇为分析纯(天津康科德科技有限公司);娃哈哈纯净水(杭州娃哈哈集团)。丹参酚酸B(实验室自制，经HNMR、CNMR、2D-NMR鉴定为丹参酚酸B，纯度98%以上)。　　1.2主要仪器　　LaballianceSeriesⅢ高效液相色谱仪(LabAlliance，USA);LaballianceAs1000自动进样器(Lab

4、Alliance，USA);Laballiancemodel500紫外检测器(LabAlliance，USA);HT-230AColunmHeater(沈阳天美达科学仪器有限公司);EzchromEliteClient/server色谱工作站(USA);FA1004N万分之一电子天平(瑞士梅特勒-托利多国际股份有限公司);Hs3120D超声波清洗器(天津恒奥)。6　　1.3药材　　一窝团、红参、系参新鲜根茎购于河北安国，阴干，粉碎过200目筛，备用。　　1.4实验方法　　1.4.1色谱条件色谱柱：ScienhomeKromasil-C18(250mm×4.6mm，5μ);流动相：乙腈-甲酸

5、-水(体积分数为26∶1∶73)，流速1.0mL·min-1;检测波长：286nm;柱温：30℃;进样量：20μL。　　1.4.2对照品溶液的制备精确称取丹参酚酸B对照品0.0299g置于10mL容量瓶中，流动相定容至刻度，精密移取丹参酚酸B对照品溶液0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8和2.0mL，定容至2mL容量瓶，备用。　　1.4.3样品溶液的制备精密称取各品种丹参样品0.3g，置于三角瓶中，各加流动相10mL，精密称定，超声提取20min。分别用溶剂补到原质量，过滤，定容至5mL容量瓶，0.45μm微孔滤膜过滤，备用。6　　1.4.4标准曲线的制备不同浓度丹参酚酸B对照品

6、溶液置于自动进样器中，分别注入液相色谱仪中，以峰面积积分值(A)对质量浓度(ρ)进行线性回归，得到线性回归方程。　　1.4.5精密度考察取不同浓度标准品，分别于1、3、5和7h测定丹参酚酸B的峰面积，计算日内精密度;取2个浓度标准品，分别于1、2、3d测定峰面积，计算日间精密度。　　1.4.6重现性实验精密称取3份丹参样品各0.3g，按1.4.3项下样品溶液配备方法，测定样品中丹参酚酸B含量，计算RSD%。　　1.4.7加样回收率精密称取5份丹参样品各0.1g，加入等体积丹参酚酸B对照品溶液，按1.4.3项下样品制备方法，测定含量，计算加样回收率(%)。　　1.4.8含量测定取不同品种丹参

7、样品各0.3g，按1.4.3项下操作，制备样品溶液。随行两个浓度标准品，采用外标两点法计算丹参酚酸B的含量(%)。　　2结果　　2.1标准曲线的绘制标准品及样品色谱图如图1所示，得到回归方程为y=981230x-342049(r=0.9990)，表明丹参酚酸B在11.96～29.9mg·mL-1范围内线性良好。6　　2.2精密度　　2.2.1日内精密度结果见表1，RSD%均小于1%。表1日内精密度　　2.2.2日间精密度