不同变异类型裕丹参中丹参酮ⅱa及丹酚酸b含量的比较研究

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1、万方数据LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL．20NO．5时珍国医国药2009年第20卷第5期不同变异类型裕丹参中丹参酮1IA及丹酚酸B含量的比较研究张红瑞1”，李志敏1，高致明h，曹金斌3(1．河南农业大学农学院，河南郑州450002；2．北京中医药大学中药学院，北京100102：3．南阳白云山和记黄埔丹参开发有限公司，河南方城473200)摘要：目的对人工栽培群体不同变异类型裕丹参中丹参酮Ⅱ．和丹酚酸B的含量进行分析，逮选优良的变异类型．为裕丹参优良品种选育提供理论依据。方

2、法采用HPLC法，以丹参酮Ⅱ．和丹酚酸B含量为检测指标，对变异类型裕丹参药材样品进行比较分析。结果丹参酮Ⅱ．和丹酚酸B在各变异类型丹参药材中的量存在较大差异。小叶型丹参酮Ⅱ．含量较高，三叶型丹酚酸B含量较高。结论裕丹参表型的变异已经引起了化学成分的变化。可以通过遴选优良的变异类型，培育高产、优质的裕丹参栽培品种。关键词：变异类型丹参；丹参酮ⅡA：丹酚酸B中图分类号：R284．2；R931．2文献标识码：B文章编号：1008-0805(2009)05．1173-01丹参Salv缸mm函砌洳Bge．为唇形科鼠尾草属植物，其干燥根及根茎入药，

3、在中国应用历史悠久。始载于《神农本草经》，被列为上品。具有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦的功效；主治月经不调，经闭痛经，瘕瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠，肝脾肿大，心绞痛川。裕丹参曼m以￡西砌妇Bge．因其根色泽紫红，品质优良，生长在古裕州(今河南省方城县)，质量优于全国各地同类产品，成为一种道地产品而得名。由于丹参是常异花授粉植物。L“。在其分布区内，由于突变、隔离及自然选择等原因，会分化出种内有差别的地理生态种群，主要表现在形态、解剖、生长发育以及药用有效成分含量等方面的变异‘4j]。本实验以栽培管理措施一致的人工栽培

4、群体中不同变异类型的裕丹参为研究对象，采用高效液相色谱(HPLC)法对不同变异类犁裕丹参中丹参酮Ⅱ。和丹酚酸B含昔进行分析，揭示不同变异类型裕丹参与有效成分的相关性，筛选优良的变异类型，为裕丹参优良栽培品种的选育提供理论依据。1器材药材为2005旬8采自河南省方城县裕丹参仿野生抚育园种质资源圃不同变异类型的丹参，由河南农业大学高致明教授鉴定。Wate瑁高效液相色谱仪，Empower色谱工作站；DiamonsilC18色谱柱(250mm×4．6toni，5斗m)；BP211D型电子分析天平；KQ一500DE型数控超声波清洗器。丹参酮Ⅱ．和

5、丹酚酸B对照品均购自中国药品生物制品检定所。甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。2方法2．1变异类型的划分以文献∞1为依据．选择容易观察的叶数、顶生叶大小、叶色等3项指标进行裕丹参变异类型的划分，设定茎生叶多7叶为多叶，多3叶为3叶。植株中部功能叶片顶生叶长大于7．0cm，宽大于4．0cm为大叶；长小于3．5cm，宽小于2．0cm为小叶。共划分4个类型，类型名称见表1。取样时分株进行编号，测定。测定部位均为主根。2．2丹参酮Ⅱ．HPLC分析条件⋯及标准曲线的制备流动相为甲醇一水(75：25)；体积流量0．8mL／rain

6、；检测波长270nm；柱温为30℃；进样量lOm。配制浓度分别为7．5，12．5，25．0，37．5收稿日期：2008Ⅲ5-07；修订日期：2008旬8—10基金项目：河南省科技厅项目(No．0624070011)作者简介：张红瑞(1978·)。女(汉族)。河南鄢陵人，现为北京中医药大学中药学院博士研究生，主要从事中药资源和药用植物栽培研究工作．‘通讯作者简介：高致明(1960-)。男(汉族)，河南南召人，现任河南农业大学农学院教授，硕士学位。主要从事药用植物资源研究工作．和50．0

7、Lg／ml的丹参酮Ⅱ．对照品溶液，按上述色谱条件测定

8、峰面积，以峰面积为横坐标(X)，以浓度为纵坐标绘制标准曲线(1，)，并进行线性回归，回归方程为：Y=3．67×106X一8．43×103(r=O．9996)。样品平均加样回收率为98．31％，RSD为1．76％。表1丹参不同变异类型形态特征样品变量蓑型矸丽_————』堕越等喾学謦刨壹——1I多叶型多7叶长>7．0cm，宽>4．0cm深绿色2普通型多5叶3．5em<长(7．0era，2．Oem<宽<4．0em绿色3三叶型多3叶3．5em<长<7．0em，2．0era<宽<4．0era深绿色!尘吐型圭i吐丝!j：j!巴：童：：：!!巴塑堡垒

9、2．3丹酚酸B眦分析条件⋯及标准曲线的制备甲醇一乙腈一甲酸一水(30：10：1：59)：体积流量0．8ml／min；检测波长286nm；柱温为30℃；进样量lO“l。配制浓度分别为5．0，10．0，15．0