两种中药配伍抗诱变作用的比较

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1、两种中药配伍抗诱变作用的比较【摘要】目的观察及对比抗诱变中药人参、五加皮、猪苓、甘草(配伍1)及人参、五加皮、茯苓、当归(配伍2)的抗诱变作用。方法以诱变剂敏感性与肿瘤易感性关系的理论为依据，采用诱变剂敏感性实验方法，取正常人外周血淋巴细胞进行培养，比较各实验组的染色体断裂率(b/c：每分裂相染色单体的断裂数)，观察并比较两种配伍的抗诱变效果。结果配伍1、配伍2抗诱变组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)，配伍1、配伍2抗诱变组与博来霉素处理组之间差异有统计学意义(P<0.01)，但两配伍组相比较，无明显差异。结

2、论配伍1、配伍2具有良好的抗诱变作用且本身不具有诱变作用，对肿瘤易感人群具有保护作用。【关键词】抗诱变中药配伍诱变剂敏感性7　　个体对致癌因素的敏感性是决定性的致病危险因素，个体的DNA损伤的修复能力影响着他对致癌因素的敏感性[1]。DNA损伤修复能力低下的个体在诱变剂作用下，由于DNA修复功能缺陷，表现为染色体断裂增加。Hsu建立的以博莱霉素为诱变剂的诱变剂敏感性检测方法，以每个细胞染色体断裂率(b/c)来表示，所以b/c值可反映个体对肿瘤的易感性。正常人群的肿瘤易感性呈梯度分布，其中存在肿瘤易感者。在以前实验中，我们通过正交实验

3、确定出两种中药配伍：人参、五加皮、猪苓、甘草(配伍1)及人参、五加皮、茯苓、当归(配伍2)[23]，现将其应用于正常人外周血进行实验，观察其对染色体稳定性的影响，并对两者的作用进行比较。　　1材料与方法　　1.1实验对象实验对象共50例，男25例，女25例，来自健康献血者，均无癌症家族史，无癌症状和病史。　　1.2药品的制备人参、五加皮、猪苓、茯苓、当归及甘草购自长春市同仁堂大药房。制备配伍1取人参800mg、五加皮800mg、猪苓800mg、甘草400mg；配伍2取人参800mg、五加皮800mg、茯苓800mg、当归400mg

4、。每组配伍分别加双蒸水300mL，水煎30min；双蒸水200mL，水煎20min；双蒸水200mL，水煎20min。混合3次水煎液，粗滤纸过滤后加无水乙醇进行醇沉24h，使醇浓度达到70%，再过滤。过滤后蒸馏，用4mL双蒸水完全溶解。装入无菌小瓶，封好，-20℃冻存备用。　　1.3培养液的制备在超净工作台内，取已灭菌的洁净培养瓶，依次加入RPMI1640培养液4mL、小牛血清1mL、PHA0.3mL、0.4%肝素4滴(6号针头)，封好，冰箱内4℃保存备用。　　1.4试剂博来霉素(BLM)，由日本化药株式会社生产。7　　1.5方法实

5、验当日采静脉血，采用微量外周血培养法，培养周期72h。实验分组：对照组、配伍1处理组、配伍2处理组、BLM处理组、配伍1抗诱变组、配伍2抗诱变组。终止培养前5h各组加入药品：配伍1处理组加入配伍1；配伍2处理组加入配伍2；BLM处理组加入BLM；配伍1抗诱变组加入BLM和配伍1；配伍2抗诱变组加入BLM和配伍2。各药终质量浓度为BLM：0.03mg/L、人参4g/L、五加皮4g/L、猪苓4g/L、甘草2g/L、茯苓4g/L、当归4g/L。加药后继续培养至72h。收获细胞，常规方法制备染色体片[4]。Giemsa染色，光学显微镜下每张

6、玻片观察50个分裂相，评价断裂标准参照CBIC(ChathamBarrsInnConference)，粉碎核型及染色单体重叠等不予计数。平均断裂≥0.8为敏感，≥1.0为高度敏感。记录染色体断裂数，计算出b/c值。　　1.6统计学方法实验数据符合正态分布，方差齐。配伍1、配伍2对染色体断裂率影响采用方差分析，α=0.05；配伍1、配伍2的抗诱变作用采用q检验，α=0.05。　　2结果　　2.1配伍1，配伍2对染色体断裂率的影响所检样本染色体自发断裂率(空白对照)为0.0232±70.0168，配伍1处理组断裂率为0.0180±0.0

7、123，配伍2处理组染色体断裂率为0.0176±0.0125。配伍组与对照组之间差异无统计学意义(F=2.47,P>0.05)。　　2.2配伍1、配伍2的抗诱变作用加入配伍1的抗诱变组的染色体断裂率为0.520±0.1485a，配伍2的抗诱变组染色体断裂率为0.5376±0.1551b，BLM诱变组染色体断裂率为0.664±0.1913。配伍1、配伍2抗诱变组与BLM诱变组相比较，差异有统计学意义(aq=5.0,aP<0.01;bq=4.39,bP<0.01)。　　3讨论　　遗传因素与环境因素均在肿瘤发病中起一定的

8、作用，前者可表现为染色体不稳定的个体其肿瘤易患性增高，后者表现为诱变剂造成DNA损伤、基因突变和染色体损伤。正常人群中诱变剂敏感性并非是“全”或“无”现象，而是呈梯度分布，其中一部分人为肿瘤易感人群。易感人群在多次接触致癌物后，产生突