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时间:2018-05-06
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1、姜黄素抗As2O3诱变作用的实验研究【摘要】目的:研究姜黄素抗三氧化二砷(As2O3)的诱变作用。方法:分别采用小鼠骨髓细胞和人外周血淋巴细胞微核(MN)实验,计数含有MN的嗜多染红细胞和淋巴细胞数,计算MN率。观察As2O3细胞诱变性及不同浓度姜黄素对As2O3诱变性作用的影响。结果:①小鼠骨髓MN试验:与As2O3组比较,As2O3+1.2mg/mL,2.4mg/mL,4.8mg/mL姜黄素组小鼠骨髓细胞MN率显著降低(P<0.05,P<0.01)。②人外周血淋巴细胞MN试验:与空白对照组比较,1μg/mL、2μg/mL、4mg/mLAs2O3组人外周血淋巴细胞M
2、N率升高(P<0.01);与1μg/mL(2μg/mL、4μg/mL)As2O3组比较,5μg/mL,10μg/mL,20μg/mL姜黄素+1μg/mL(2μg/mL,4μg/mL)As2O3组MN率降低(P<0.05,P<0.01)。结论:As2O3具有剂量相关的致突变作用,姜黄素具有明确的抗As2O3诱变性作用。【关键词】姜黄素;三氧化二砷;诱变性AbstractObjective:ToobservetheinhibitiveeffectofcurcumineagainstmutagenicityofAs2O3.Methods:①Micronucleus(MN)f
3、requencytestinbonemarroice:60micelydividedintoblankcontrolgroup,As2O3groupand1.2μg/mL,2.4μg/mL,4.8μg/mLcurcumine+As2O3group(n=12).BlankcontrolgroupandAs2O3groupinisteredsaladoilthroughintragastricalperfusionfor7days.ThenblankcontrolgroupLsaline,otherthreegroupsLAs2O3solution(20μg/mL).24
4、hlater,micearroiceade.②MNfrequencytestinperipheralbloodlymphocyteofhuman:humanbloodsamplesL,2μg/mL,4μg/mLAs2O3group,5μg/mL,10μg/mL,20μg/mLcurcumine+1μg/mL(2μg/mL,4μg/mL)As2O3group.ThenMNfrequencytestinperipheralbloodlymphocyteofhumanadetostudymutagenicityofAs2O3.Results:①paredg/mL,2.4mg
5、/mL,4.8mg/mLcurcumine+As2O3groupL(2μg/mL,4μg/mL)As2O3group,MNfrequencyin5μg/mL,10μg/mL,20μg/mLcurcumine+1μg/mL(2μg/mL,4μg/mL)As2O3grouputageniceffect,andcurcuminehasaremarkableantimutageniceffectagainstAs2O3.Keyine,As2O3,mutagenicity姜黄素(curcumine)是从中草药姜黄(curcumaaromatica)中提取的一种酚性食用色素。近年
6、来,国内外许多学者证实姜黄素本身不具有诱变性,并可明显抑制某些致突变物的诱变作用。有研究报道,姜黄素的抗诱变作用可能是通过改变诱变物的代谢活性来实现的[1-2]。本课题以小鼠骨髓微核实验验证姜黄素拮抗As2O3的诱变性作用,并以人外周血淋巴细胞微核实验来检验姜黄素抗As2O3诱变作用的量效关系,在此基础上,探讨姜黄素抗诱变作用的可能机理,为研制开发抗诱变药品和保健品提供实验依据。1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验动物昆明种小鼠60只,体重(20±2)g,雌雄不分。1.1.2药品与试剂姜黄素为上海三爱思公司产品,用时分别以色拉油溶解为4.8mg/mL、2.4mg/
7、mL、1.2mg/mL浓度溶液(用于小鼠骨髓MN实验)和以少量DMSO溶解后用无血清培养基稀释为110g/mL、220g/mL、440g/mL浓度的溶液(用于人外周血淋巴细胞MN实验)。As2O3注射液(5mmoL/10mL)为哈尔滨伊达药业有限公司产品,用时分别以生理盐水(用于小鼠骨髓MN实验)和无血清培养基(用于人外周血淋巴细胞MN实验)稀释为各浓度溶液。RPMI-1640培养液:用分析天平称取RPMI-1640粉剂4.16g、碳酸氢钠0.8g溶于400mL双蒸水,加入新生牛血清100mL、2万U/mL链霉素溶液2.5mL、2万U/mL青霉素溶液
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