nogoa在脑缺血再灌注白质损伤中的表达及其意义

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1、NogoA在脑缺血再灌注白质损伤中的表达及其意义作者：高晓玉王得新张拥波【摘要】目的检测脑缺血再灌注后不同时间点轴突生长抑制因子NogoA在损伤白质区的基因表达，探讨NogoA与缺血再灌注白质损伤的可能关系。方法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型，实时定量聚合酶链反应方法(RelativeQuantificationPCR,RQPCR)检测各时间点NogoA在损伤白质区域的基因表达。结果在损伤白质区域，NogoA基因表达在缺血再灌注1d时表达量开始减少(与假手术组相比，P<0.05)

2、，7d时降至最低，14～21d表达量开始上调，21d时仍低于假手术组水平(与假手术组相比，P<0.001)。结论缺血再灌注损伤后白质区域的NogoA基因表达呈现动态变化规律，针对NogoA进行干预有望为缺血再灌注损伤后的脑保护治疗找到新的靶点。【关键词】脑缺血;NogoA;白质损伤　　【Abstract】ObjectiveTostudytheexpressionofNogoAincerebralwhitematterafterfocalcerebralischemiareperfusion(I/

3、R)inrats,andexploretherelationshipbetweenNogoAandcerebralwhitematterlesionsafterischemia.5MethodsSpragueDawleymaleratsweresubjectedto2hofmiddlecerebralarteryocclusion(MCAO).RelativequantificationPCR(RQPCR)wasperformedtoexaminetheexpressionsofNogoAgeneatd

4、ifferentreperfusiontime.ResultsTheexpressionlevelofNogoAgeneinthewhitematterwasdecreasedin1dgroup(P<0.05vsshamgroup),andwastheweakestin7dgroup.Itwasincreasedin14～21dgroup,andin21dtheexpressionlevelwasstilllowerthanthatofshamgroup(P<0.001).ConclusionsN

5、ogoAexpreesionhasdynamicchangesinthewhitematterafterfocalcerebralI/R.NogoAcouldbeasoneofthetargetsforneuroprotectivetherapyaftercerebralischemia.　　【Keywords】Cerebralischemia;NogoA;Whitematterlesion　2000年,Chen等人克隆出大鼠和人类抑制受损轴突再生的基因NogoA基因〔1～3〕。这一基因广泛存在于中枢

6、神经系统神经元和少突胶质细胞中,NogoA蛋白与NogoA基因分布一致〔4〕。中枢神经损伤后NogoA蛋白与p75NTRNgR受体复合物结合,发挥抑制神经再生的作用〔5〕。给大脑中动脉栓塞(MCAO)大鼠注射抗NogoA的单克隆抗体中和其作用,可以使轴突分支及树状棘的密度增加,即使给正常大鼠注射,也能产生短暂的轴突过度生长的现象〔6〕。这说明Nogo5A在一定程度上可以限制轴突再生。NogoA的发现,为中枢神经系统的损伤修复带来了新的希望。而目前有关NogoA与缺血再灌注白质损伤的关系并不清楚。

7、本实验利用大鼠MCAO模型，观察再灌注损伤后NogoA基因在损伤白质区域表达的时空变化规律，以探讨NogoA与缺血性脑白质损伤的可能关系。　　1材料与方法　　1.1动物成年健康雄性SpragueDawley大鼠48只，SPF级，体重250～280g。购自北京维通利华实验动物技术有限公司，动物自由进食进水。　　1.2大脑中动脉阻塞(MCAO)模型的制备动物房12h光暗交替，55%相对湿度，温度22℃。动物适应环境1w后开始实验。应用线栓法建立右侧MCAO模型〔7，8〕。随机分为缺血120min再灌流6、12h

8、、1、3、7、14、21d组，每组6只，用于实时定量聚合酶链反应(RQPCR)的检测。另取6只作为假手术组，假手术组除插线长度为15mm外，余步骤同实验组。参照ZeaLonga5分制评分标准〔8〕,待大鼠麻醉清醒后进行评分，剔除评分为0分或4分的大鼠。每组大鼠在规定的时间点取材，假手术组于手术后1d取材。以10%水合氯醛(0.6ml/kg)腹腔注射麻醉大鼠，立刻断头，冰上取右脑，切去