β射线内照射对人增生前列腺细胞凋亡的影响

《β射线内照射对人增生前列腺细胞凋亡的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、β射线内照射对人增生前列腺细胞凋亡的影响作者：谷欣权曹霞孔祥波马庆杰【摘要】目的探讨β射线内照射对人增生前列腺细胞凋亡的影响。方法20例前列腺增生(BPH)患者随机分为4组：对照组未行内照射，3组照射组于前列腺切除术前1，4，7d行90Sr/90Yβ射线内照射，采用TUNEL染色、流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳检测前列腺细胞凋亡变化。结果与对照组比较，β射线内照射后前列腺细胞凋亡增多，并随时间延长而增加（P＜0.01），对照组基因组DNA保持完整，β射线辐射7d后基因组DNA呈现梯状带凋亡改变。结论β射线内照射能够有效诱发人增生的前列腺细胞凋亡，进而引起前列腺组织萎缩。【关键词】前列腺增生；电

2、离辐射；细胞凋亡【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofβirradiationoncellapoptosisinhumanhyperplasticprostatictissues.Methods20patientswithbenignprostatichyperplasia(BPH)weredividedinto4groupsaccordingtothedifferenttimetreatedwith90Sr/90Yβirradiationtoprostatichyperplasiaapplicatorbeforeprostatectomyo

3、rTURP.ThecellapoptosisofhumanhyperplasticprostatictissueswasdetectedbyTUNELand8flowcytometryandagarosegelelectrophoresis.ResultsComparedwithcontrolgroup,thepercentageofcellapoptosisaroseaftertreatedwith90Sr/90Yβirradiationandgrewmorewithtimegoing(P＜0.01).DNAkeptcompleteincontrolgroupwhiletypicalDN

4、AladderbandappearedinDNAfragmentelectrophoresisandthepositivecellsthatpresentedbrowedwereobservedinβirradiation7group.Conclusionsβraysirradiationcanefficientlyinducecellapoptosisfromhumanprostatichyperplasiatissueandcausetheatrophyofprostatictissue.【Keywords】Benignprostatichyperplasia；Radiation；A

5、poptosis细胞凋亡在前列腺增生（BPH）的发生、发展中具有关键性作用〔1，2〕。电离辐射作为一种基因毒素，除了可使前列腺组织中与细胞凋亡相关的基因和细胞因子发生改变外，还能直接或间接引起DNA损伤而诱发凋亡〔3，4〕。本实验采用TUNEL染色、流式细胞术（FCM）和琼脂糖凝胶电泳检测β射线内照射对增生前列腺细胞凋亡的影响，为采用电离辐射治疗BPH提供实验依据。1材料与方法81.1实验分组BPH患者20例，年龄58～72岁，病程2～13年，患者随机分为4组，每组5例：3个照射组于前列腺切除术前1，4，7d行90Sr/90Yβ射线内照射，照射剂量为30～50Gy，对照组未行内照射。各组均

6、行经尿道前列腺切除术或经膀胱前列腺摘除术获得前列腺标本。1.2TUNEL染色检测细胞凋亡4%多聚甲醛固定前列腺组织4～6h，石蜡包埋。切片加蛋白酶K37℃消化5min，TBS洗涤。加含有TdT和DIGdUTP的标记液20μl/片，37℃标记2h，TBS洗涤2min×3次。加封闭液50μl/片室温30min，加封闭液1∶100稀释生物素化抗地高辛抗体50μl/片，37℃反应30min，TBS洗涤。加SABC37℃反应60min，TBS洗涤。DAB显色15min，苏木素复染，常规脱水、透明、封片。显微镜下凋亡阳性细胞核呈深浅不一的棕黄色，正常细胞核呈蓝色，在每张切片上随机选取10个高倍镜视

7、野，计阳性细胞数和细胞总数，计算阳性反应细胞数占细胞总数的平均百分比。1.3FCM检测凋亡细胞DNA含量新鲜组织研磨成单细胞，70%冷乙醇固定，4℃过夜。600r/min离心5min，弃上清，加0.01mol/LPBS5ml，混匀1500r/min离心，弃上清，反复3次。用PBS调整细胞浓度106/ml，过350目滤网，制成单细胞悬液，加入浓度200μg/ml的RNaseA，37℃水浴30min，加入低渗荧光染料溶液混匀