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时间:2018-08-01
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1、Wnt3基因在急性髓系白血病中的表达及意义作者:李胜利,徐开林,李振宇,潘秀英,曾令宇【摘要】目的研究Wnt3基因在急性髓系白血病(AML)患者中的表达及其意义。方法应用实时定量PCR(real-timePCR)方法检测10名正常人、40例AML患者中Wnt3基因的表达。结果10例正常人中检测到较低水平Wnt3基因的表达;Wnt3基因在AML患者中的表达水平增高,AML缓解后Wnt3基因的表达水平较初诊时明显降低;Wnt3的表达与AML患者年龄、性别以及初诊白细胞数等临床特征无关;Wnt3低表达组完全缓
2、解率高于高表达组。结论Wnt3在AML发病中可能起重要作用,可作为判断AML预后的一个指标。【关键词】急性髓系白血病;Wnt3基因;基因表达Abstract:ObjectiveToexploretheexpressionandsignificanceofWnt3geneinacutemyelogenousleukemia(AML)patients.MethodsExpressionofWnt3genewasdetectedbyreal-timePCRin10healthypeopleand30AMLpa
3、tients.ResultsTheexpressionofWnt3genewaslowerinthe10healthypeopleandwashigherinAMLpatients.TherewasmarkeddeclineintheexpressionlevelofWnt3geneaftercompleteremissionascomparedtotheinitial10treatment.TheexpressionlevelofWnt3genewasnotcorrelatedwiththeage,g
4、enderandtheclinicalcharacteristicsatinitialdiagnosissuchasthewhitebloodcell(WBC)countandchromosomalkaryotypeinAMLpatients.Thecompleteremission(CR)rateinAMLpatientswithlowexpressionlevelofWnt3genewashigherthanthatinthosewithhighexpressionlevel.ConclusionW
5、nt3mayplayanimportantroleinAMLpathogenesisandcanserveasanindexinmonitoringAMLprognosis.Keywords:acutemyeloidleukemia;Wnt3geme;geneexpressionWnt3基因首次发现于小鼠的乳腺癌细胞,将小鼠乳腺癌病毒插入Wnt3基因位点附近可以诱导乳腺癌的发生。人类的Wnt3基因定位于17号染色体长臂(17q21)[1],在急性髓系白血病(AML)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者以及
6、乳腺癌﹑卵巢癌细胞株中表达增加。本实验采用实时定量PCR(real-timePCR)方法检测Wnt3基因在40例AML患者中的表达,并分析其意义。1资料和方法1.1研究对象101.1.1实验组2007年6月—2008年6月徐州医学院附属医院血液科住院和门诊AML患者40例(初诊30例,复发10例)。其中M215例,M36例,M48例,M511例。男20例,女20例,中位年龄36(11~76)岁。10例初诊AML患者随访其缓解前后骨髓,随访中位时间1(0.5~3)个月。所有患者经过骨髓细胞形态学、组织化学
7、染色、免疫表型、分子生物学、细胞遗传学等检查确诊。完全缓解(CR)指临床、血象及骨髓细胞学缓解,未缓解指部分缓解(PR)和未缓解(NR)。1.1.2正常对照组10名,男4名,女6名,中位年龄32(24~48)岁,均为缺铁性贫血患者和造血干细胞移植供者。1.2主要试剂、仪器Trizol抽提试剂盒(BBI公司)、AMV逆转录酶试剂盒(TOYOBA公司)、TaqDNA聚合酶试剂盒(纽英伦生物技术有限公司)、dNTPs(SANGON公司)、DANLadder(MBI公司)、SYBRPremicExTaq试剂盒(
8、TOYOBA公司)、DEPC(AMRESCO公司)、PE-2400PCR基因扩增仪(ABI公司)、Real-time7500荧光定量PCR仪(ABI公司)。Wnt3引物序列(扩增产物147bp,退火温度59℃):上游5′-ACGCTGACTTCGGCGTGTTAG-3′;下游5′-CGTGGCACTTGCATTTGAGG-3′。10内对照2,3-二羟基丙醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)引物序列(扩增产物203bp,退火温度57℃):上游5′
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