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时间:2018-08-01
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1、HBsAgHBeAg含量及前S1抗原与乙肝病毒DNA间关系探讨 作者:钱瑛,胡志刚,乔伟振,陈国千【关键词】HBsAg;HBeAg;前S1抗原;乙肝病毒DNA我国在世界上属于乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发区,乙肝表面抗原(HBsAg)的携带者已超过10%。随着新型的时间分辨荧光免疫法(TRFIA)的应用,使HBV免疫检测趋于超微量化。为了解HBsAg、HBeAg含量以及前S1抗原与乙肝病毒DNA之间的关系,本文对乙肝患者和乙肝病毒携带者共97例进行了HBsAg和HBeAg含量、乙肝病毒DNA及前S
2、1抗原的检测,现将结果报告如下。 1材料与方法 1.1对象 2005年7月至11月在我院门诊和病房就诊的急、慢性乙肝患者和乙肝病毒携带者97例,其中男65例,女32例,年龄15岁~68岁。健康对照22例,男15例,女7例,年龄23岁~52岁。留取清晨空腹静脉血5ml,分离血清,-20℃冻存待检。6 1.2检测方法 1.2.1HBsAg、HBeAg定量 Wallac公司生产的AutoDELFIA1235时间分辨荧光免疫分析仪,上海新波公司配套试剂盒,HBsAg阳性界值10ng/ml,HBeAg阳性界值0
3、.03Ncu/ml。 1.2.2乙肝病毒DNA Roche公司生产的Lightcycler荧光定量PCR仪,上海复星医药集团提供荧光定量试剂盒,>103copy/ml为阳性。 1.2.3前S1抗原 双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),上海阿尔法生物技术有限公司配套试剂盒。 1.3统计学分析 采用两组独立样本的t检验,相关性分析,配对分类资料χ2检验,所有数据用EXCEL2003软件自带的统计功能处理。6 2结果 2.1不同HBsAg、HBeAg含量与HBVDNA关系 HBVDNA阳
4、性组HBsAg、HBeAg含量大于阴性组,差异均有显著性,结果见表1。HBVDNA阳性组HBsAg、HBeAg含量与HBVDNA含量成正相关,相关系数(r)分别为0.328,P<0.01;0.484,P<0.01。表1HBsAg、HBeAg含量与HBVDNA关系(略)注:*HBsAg含量与阴性组比较P<0.01;**HBeAg含量与阴性组比较P<0.01。 2.2HBVDNA与HBeAg、PreS1间的关系 结果见表2。HBVDNA阳性率70.1%(68/97),HBeAg
5、阳性率39.2%(38/97),PreS1阳性率64.9%(63/97),经配对资料χ2检验,HBVDNA阳性率大于HBeAg阳性率,差异有显著性,HBVDNA与PreS1阳性率差异无显著性。表2HBVDNA与HBeAg、PreS1间的关系(略)注:HBVDNA与HBeAg相比χ2=23.36,P<0.05;HBVDNA与PreS1相比χ2=1.23,P>0.05。 3讨论6乙肝病毒复制是一个相当复杂的过程,目前还存在许多未解之迷。HBsAg作为HBV感染的特异标志,是由S基因编码
6、的蛋白,本文结果显示虽然其含量与HBVDNA含量成正相关,但关系不够密切。这可能是因为部分慢性乙肝患者中,HBsAg低表达或S区基因变异使常规检测试剂无法检出,但此时仍有病毒复制。而在无病毒复制者中,仍可能存在的小球形颗粒的包膜蛋白几乎全部是S蛋白[1,2],表现出HBsAg含量较高。HBVDNA是反映病毒复制活动最直接、可靠的指标[3]。一般认为HBeAg阳性和含量与乙肝病毒的复制情况及传染性的强弱成正相关[4]。本实验结果:HBeAg含量与HBVDNA含量成正相关,相关程度中等(r=0.484),也验证
7、了这一理论。HBVDNA阳性率(70.1%)大于HBeAg阳性率(39.2%),P<0.05,说明HBVDNA比HBeAg更敏感。在HBVDNA阳性患者中,有48.5%(33/68)的患者HBeAg为阴性,可能是由于与HBeAg表达有关的前C区或(和)C区发生启动子/终止密码突变,从而表现为HBeAg阴性,这些乙肝病毒异变株与重肝发生或慢性肝炎恶化有关[5]。因此单一的HBeAg作为判断乙肝病毒复制活跃与否的指标是不够的。同样作为病毒复制的指标,PreS1与HBVDNA相比,HBVDNA阳性率(
8、70.1%)与PreS1抗原阳性率(64.9%)比较差异无显著性(P>0.05),说明Pre6S1与乙肝病毒复制密切相关。有研究[1]证明:小球形颗粒的包膜蛋白组成随病毒是否复制而异,在肝内病毒非复制期,大蛋白(由S、PreS1及PreS2基因区所编码)在血清中很低和无,大量滞留在肝细胞中,因此可以根据检测血液中大蛋白的有无,来判断病毒携带者体内的HBV病毒
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