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时间:2018-08-01
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1、IgA肾病小鼠模型的建立与鉴定【摘要】目的建立小鼠IgA肾病模型,为临床研究IgA肾病提供实验依据。方法昆明种小鼠30只,分为正常对照组(10只)、模型组(20只)。采用口服牛血清白蛋白(BSA)联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B(SEB)的方法制作小鼠IgA肾病模型。第12周末收集新鲜尿液,显微镜下尿红细胞定性检验;摘眼球取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);光镜法观察肾小球系膜细胞及基质变化;电镜法检测系膜区有无电子致密物沉积;免疫荧光法观察系膜区IgA沉积情况。结果第12周末,模型组小鼠均出现不同程度的血尿;Scr、BUN较正常对照组显著增高(P<0.0
2、1);光镜下系膜细胞及基质明显增生;电镜下系膜区电子致密物沉积;免疫荧光示系膜区大量的IgA沉积,而正常对照组则无上述表现。结论IgA肾病小鼠模型效果良好,病理、电镜及临床指标与人类IgA肾病临床病理相似。【关键词】IgA肾病;模型;血尿;免疫荧光;小鼠 Abstract:ObjectiveToestablishmousemodelofIgAnephropathyinordertoprovideexperimentbasisfortheclinicalresearchofIgAnephropathy.Methods30Kunmingmicewererandomlyas
3、signedintothecontrolgroup(n=10)andthemodelgroup(n=20).MousemodelofIgAnephropathywasestablishedbythemethodoforalintakeofbovineserumalbumin10(BSA)togetherwithinjectionofstaphylococcusenterotoxinB(SEB)viathecaudalvein.Attheendofthe12weeks,freshurinewasgatheredforthequantitativetestofhematur
4、ia;bloodwastakenthroughorbitalsinusaftereyeballextirpationtodeterminetheserumcreatinine(Scr)andbloodureanitrogen(BUN);thechangesofmesangialcellsandmatrixinthekidneyswereobservedbylightmicroscopy;electronmicroscopywasemployedtodetectelectron-densedepositsinthemesangialarea;theexpressionof
5、IgAdepositionwasmeasuredbyimmunofluorescencestaininginthemesangialarea.ResultsBytheendof12weeks,thereweredifferentdegreesofhematuriainmodelgroupmice.BUNandScrlevelsinmodelgroupweresignificantlyhigherthaninthenormalcontrolgroup(P<0.01).Lightmicroscopyshowedevidentproliferationofmesangi
6、alcellsandmatrix.Electronmicroscopydemonstratedahighelectrondensedepositioninthemesangialarea,whiletheaboveabnormalitieswerenotobservedinthenormalcontrolgroup.ConclusionThemousemodelofIgAnephropathyproveseffective,withpathologicalelectronmicroscopicandclinicalparameterssimilartotheclinic
7、alpathologyofhumanIgAnephropathy.10 Keywords:IgAnephropathy;model;hematuria;immunofluoresencestaining;mice IgA肾病世界范围内广发的一种系膜增生型肾小球肾炎,占原发性肾小球疾病的10%~20%,中国、日本、新加坡等发病率较高,其中有20%~30%的患者进展到肾衰[1]。建立与人类临床病理生理相似的IgA肾病动物模型,对研究IgA肾病的发病机理、临床治疗等具有重要的作用。本实验采用口服牛血清白蛋白联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素的方法
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