accqtag法测定复方氨基酸注射液(18aaⅴ)中17种氨基酸的含量

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1、AccQTag法测定复方氨基酸注射液(18AAⅤ)中17种氨基酸的含量作者：陈宇堃,梁蔚阳,薛巧如,王淼【摘要】目的建立测定复方氨基酸注射液(18AAⅤ)中17种氨基酸含量的方法。方法采用AccQTag法，以6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂，与复方氨基酸注射液(18AAⅤ)中17种氨基酸柱前衍生，用Waters2695HPLC仪器，AccQTagTM柱，以醋酸钠(pH4.95)缓冲液为流动相A，乙腈为流动相B，水为流动相C进行梯度洗脱，检测波长为248nm，柱

2、温为37℃，进样量为5μL。结果17种氨基酸的线性回归方程r值为0.9996～0.9999(n=5)，平均回收率为93.3%～104.4％（RSD值为0.88%～3.05％，n＝6）。结论本法快速，简便，结果准确。【关键词】AccQTag法；复方氨基酸注射液(18AAⅤ)；6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）；柱前衍生化法　　Abstract:ObjectiveToanalyzethecontentsof17aminoacidsincompoundaminoacidinjectio

3、nusingAccQTagmethod.MethodsTheaminoacidsintheinjectionswerepretreatedwith6aminoquinolylNhydroxysuccinimdylseparatelyandtheirderivativeswereanalyzedonWaters26958HPLCusingAccQTagcolumn.Gradienteluentsconsistedofsodiumacetatesolution(pH4.95),acetonit

4、rileandwater.TheDetectionwavelengthwas248nmandcolumntemperature37℃.ResultsThecalibrationcurvesfor17aminoacidshadgoodlinearity(r=0.9996～0.9999,n=5).Themeanrecoveriesof17aminoacidswere93.3%～104.4%withRSD0.88%～3.05%(n=6).ConclusionThemethodisquick,simplef

5、orthecontentanalysisoftheaminoacidsintheinjections.　　Keywords:AccQTagmethod;compoundaminoacidinjection;6aminoquinolylNhydroxysuccinimdylcarbaminate(AQC);precolumnderivatization　　复方氨基酸注射液(18AAⅤ)主要含17种氨基酸，包括门冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、盐酸组氨酸、盐酸精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪

6、氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、盐酸赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和色氨酸。复方氨基酸注射液用于治疗由于胃肠道疾病引起的消化和吸收障碍而造成的蛋白质缺乏症；因手术创伤、烧伤而需要增强蛋白质消耗者；因某些疾病而引起的低蛋白血症；在手术前后营养不良时，增加氨基酸的供应使体内达到正氮平衡，促进伤口愈合，体力恢复；消耗性疾病或癌症因化疗引起的食欲降低，需补充蛋白质摄入的患者［1］。本文采用AccQ8Tag方法［2，3］测定该制剂的氨基酸含量，以6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（AQC）为衍生试剂与各氨

7、基酸柱前定量衍生后，再经AccQTagTM柱梯度洗脱。结果表明本方法具有专属性，且简便、快速、灵敏度高、重现性好。　　1试剂与试药　　　　门冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、盐酸组氨酸(His·HCl·H2O)、盐酸精氨酸(Arg·HCl)、苏氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Val)、甲硫氨酸(Met)、盐酸赖氨酸(Lys·HCl)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)对照品均

8、为中国药品生物制品检定所提供（批号：624—200104），质量分数均为100.0％。6氨基喹啉N羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯（简称AQC）、AQC稀释液和硼酸盐缓冲液（pH8.8）均为WATERS公司提供。复方氨基酸注射液（18AAⅤ）（规格：500mL∶16.12g;批号：0604281、0603285，广东利泰药业有限公司提供；批号：051101，广东庆发药业有限公司提供），乙腈（色谱纯），其他试剂均为分析纯。　　　仪器：WatersEMPOWER色谱工作站，