60coγ射线照射对肺泡ii型细胞和肺泡隔间质细胞的生物效应

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1、60Coγ射线照射对肺泡II型细胞和肺泡隔间质细胞的生物效应作者：刁瑞英,宋良文,王少霞,李明【摘要】　　目的:探讨60Coγ射线照射对肺泡II型细胞和肺泡隔间质细胞的生物效应。方法:原代分离肺内II型上皮细胞(ATⅡ)和间质细胞包括巨噬细胞和成纤维细胞,分别进行0、3、5、7Gy的γ射线照射,用细胞核嗜银染色观察照射对ATⅡ增殖的影响;用酶谱分析检测照射后ATⅡ和间质细胞培养上清中基质金属蛋白酶2、9（MMP2,9）的活性;用ELISA检测间质细胞培养上清中TGFβ1和IV型胶原含量。结果:ATⅡ的核仁数量随照射剂量增加而增多,其中7Gy

2、组最高;ATII培养上清中MMP2、9活性随照射剂量增加呈先增高后降低趋势,间质细胞上清中MMP2、9活性和TGFβ1水平逐渐升高,IV型胶原分泌水平呈先降低后升高趋势。结论:放射性肺损伤早期,ATⅡ、巨噬细胞和成纤维细胞均参与肺组织无效性重建过程,与晚期肺纤维化启动有一定的内在联系。【关键词】肺泡II型上皮细胞间质细胞MMPsTGFβ1IV型胶原　　[Abstract]AIM:Toexplorethebiologicaleffectof60CoγrayonalveolartypeⅡcellsandinterstitialcellsofalve

3、oliarseptum.METHODS:AlveolartypeⅡcells（ATⅡ）and12interstitialcellsincludinginterstitialmacrophagesandfibroblastswereirradiatedby0,3,5,7Gyofγrayrespectively.TheeffectofirradiationonATⅡproliferationwasobservedbyargentationagainstnucleus.TheactivityofMMP2,9insupernatantsfromATⅡand

4、interstitialcellsafterirradiationwasdeterminedbyzymography.ThelevelsofTGFβ1andcollagentypeIVinsupernatantfrominterstitialcellsafterirradiationweremeasuredbyELISA.RESULTS:ThenucleolusnumberofATⅡwasincreasedwiththeincreaseofirradiationdoseandgroup7Gyreachedthehighestlevel.Theactivi

5、tyofMMP2,9insupernatantfromATⅡafterirradiationincreasedatfirstandthendecreasedgradually.TheactivityofMMP2,9andthecontentofTGFβ1ininterstitialcellsincreasedstepbystep,butcollagentypeIVdecreasedatfirstandthenincreased.CONCLUSION:ATⅡ,macrophagesandfibroblastsareallinvolvedinpul

6、monaryinvalidremodelingcourseinearlyradiationpulmonaryinjury,whichisrelatedtotheinitiationofpulmonaryfibrosisinlateperiod.　　[Keywords]alveolartypeⅡcell;interstitialcell;MMPs;TGFβ1;collagentypeIV12　　放射性肺损伤和肺纤维化为临床常见并发症,其发生机制尚未完全明了,因此有效防治较为困难[1]。肺损伤早期的形态学改变主要是肺泡基底膜Ⅳ型胶原降解[2],继发引起成纤维细

7、胞增生及Ⅳ型胶原再度增多,常导致肺重建发生。基质中IV型胶原合成和降解平衡失调可能与晚期肺纤维化的启动有关。基质金属蛋白酶2和9(Matrixmetalloproteinase2,9,MMP2,9)是IV型胶原特异性降解酶。多种细胞参与了肺损伤重建过程,其中肺泡II型细胞和肺泡隔间质细胞（包括巨噬细胞,alveolarmacrophages,AM;成纤维细胞,fibroblast,Fb）在肺损伤重建和纤维化发生中起重要作用。本研究拟原代分离上述细胞,探讨60Coγ射线对肺内细胞的生物学效应以及在早期肺损伤重建中的作用,揭示放射性肺损伤与肺纤维化之间的

8、内在联系。　　1材料和方法　　1.1材料Wistar