猕猴桃叶中黄酮物质提取工艺研究

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1、猕猴桃叶中黄酮物质提取工艺研究摘要猕猴桃叶介绍实验内容关键词目录第一章文献综述1.1猕猴桃叶1.1.11.1.2国内外研究现状1.2黄酮类化合物的概述1.2.11.3黄酮类物质的提取工艺研究进展1.3.11.4本文选题依据第二章实验部分2.1材料与试剂、仪器2.1.1材料2.1.2试剂与仪器2.2方法与步骤2.2.1猕猴桃叶中黄酮物质含量测定方法的建立2.2.2猕猴桃叶中黄酮物质提取工艺研究第三章结果与分析3.1芦丁标准曲线的制作结果3.2猕猴桃叶中黄酮物质提取工艺研究3.2.1最佳提取工艺的确定3.2.2最佳工

2、艺条件的确定3.2.3猕猴桃叶中黄酮物质粗品中总黄酮得率第四章讨论4.1猕猴桃叶中黄酮物质提取工艺4.2提取工艺条件第五章结论参考文献致谢第一章文献综述1.11.2黄酮类化合物的概述黄酮类化合物(flavonoids)是指以2-苯基色原酮为基本结构衍生出来的一系列化合物。在自然界中分布比较广泛,高等植物及羊齿类植物比较多,有些苔类中也有,在与我们日常生活密切的粮食、蔬菜和水果中含量也很大。天然黄酮类化合物大多数与糖结合成苷,以苷的形式存在,也有些以游离体(苷元)形式存在。其2-苯基色原酮母体结构上通常含有一些助色

3、团:酚羟基、甲基、异戊烯基、甲氧基等,由于这些官能团的存在,黄酮类化合物通常呈现不同的颜色,一定条件下,黄酮类物质可以与特定的试剂发生颜色反应(与酚羟基和γ-吡喃酮环有关系)。根据黄酮类化合物的结构特点,可以分为以下几种:黄酮类(flavone)和黄酮醇类(flavonol),异黄酮类(isoflavone)和二氢异黄酮类(dihydroisoflavone),二氢黄酮类(dihydroflavone)和二氢黄酮醇类(dihydroflavol),查尔酮类(chalcone)、橙酮类(aurones)、黄烷类(f

4、lavanes)、花色素类(anthocyanidins)等(姚新生2002:168)黄酮类化合物具有酸性和碱性:γ-吡喃酮环上的氧原子能与强的无机酸结合,生成性质不稳定的盐而呈现弱碱性,由于酚羟基的存在能够溶于碱性溶液呈现酸性(姚新生2002:175).黄酮类化合物具有解肝毒、抗氧化,抗肿瘤(SteinCJandColditzGA2004)、抗炎、抗菌及抗病毒等多种生理活性。1.2.1黄酮类化合物提取方法(1)水提法适用于黄酮苷类物质的提取。优点是:成本低、安全、设备简单,适用于工业化大生产。缺点:提取率低,杂

5、质较多(蛋白质、无机盐和糖类),后续分离麻烦,且易霉变,一般情况下不单一使用。(2)碱性水或者碱性烯醇提取法黄酮类成分大多具有酚羟基,易溶于碱水(碳酸钠、石灰水、氢氧化钠)或碱性烯醇(50%的乙醇),酸化后可沉淀析出。作用原理是碱性条件下,其苯基色原酮的1,2碳之间的碳氧键打开变成查耳酮性结构,这种结构可以溶于水,酸性条件下,查耳酮又会恢复为闭环状态。碱溶酸沉法在实际生产中用得比较广泛。石灰水浸出效果不如氢氧化钠水溶液,且有些黄酮类物质能与钙结合成不溶性物质不被溶出(李苑和张敏1999)。此法提取纯化时应注意:避

6、免使用强碱(以免强碱在加热是破坏黄酮)、强酸(防止酸化时生成盐影响提取率)。(3)有机溶剂提取法常用的溶剂有乙酸乙酯、甲醇、乙醇、丙酮及一些极性较大的混合溶剂(如甲醇:水=1:1)。乙醇提取时常用的方法之一,因为乙醇溶解性能比较好,一般水溶液的大多数都能在乙醇中溶解。毒性小,价廉,可以回收反复使用,醇提取不易霉变。一般用90%-95%的乙醇提取苷元,60%左右的乙醇提取苷类。石油醚、乙酸乙酯等提取黄酮苷元部分。常用的提取方法有:冷浸法、渗漉法和回流法。这三种提取方法各有优缺点:冷浸法提取时间长、效率低,一般用于提

7、取热敏性成分:渗漉法提取效率高杂质较少,但是费时长、溶剂用量大;回流效率最高,但杂质含量相对较高,含有受热易被破坏成分的药材不适用。(4)超声提取法超声波提取技术是利用超声波的空化效应加速有效成分的浸出,能效低,效率高,不破坏有效成分。空化效应、热效应和机械作用是超声技术在中药提取中的三大理论依据(王昌利等1993)。(5)微波辅助萃取法(microwaveassistedextraction,MAE)微波辅助萃取是利用物质吸收微波能力的差异,选择性加热,从而是被提取物质分离进入提取剂中(王艳和张铁军2005)。

8、而且微波产生的电磁场可以加速被萃取成分向萃取溶液界面扩散,使有效成分在相对较低的温度下以最快的速度被萃取,从而最大限度的保证萃取的质量。选择性高、易控制、得率高、无污染(李巧玲2003)。(6)酶解法传统的溶剂提取法是利用提取溶剂中有效成分的浓度梯度,通过扩散作用促使被提取成分逐渐分散到提取试剂中达到分离的目的。但是由于植物细胞壁中纤维组织的阻碍,往往提取时间长,溶剂用量

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