金银花干叶中黄酮类物质提取工艺研究

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1、金银花干叶中黄酮类物质提取工艺研究【摘要】本实验以乙醇为溶剂,采用超声波法从金银花干叶中提取黄酮,并通过单因素考察和四因素三水平的正交试验确定超声波法提取金银花干叶中黄酮类物质的最佳工艺条件。同时,运用最佳工艺条件提取金银花植物各部分的黄酮并测定其含量。结果表明,最佳提取工艺是以70%乙醇、物料比1:10,超声波温度60℃提取20min;黄酮含量测定结果显示,金银花干花的黄酮含量比干枝、干叶和鲜枝、鲜叶高约4-6倍。【关键词】金银花干叶;黄酮;提取工艺;正交试验;含量测定1目录1前言12仪器与材料33实验方法43.

2、1样品预处理43.2试剂配制43.2.1配制芦丁标准应用液43.2.2建立工作曲线43.3总黄酮的测定53.3.1铝配合物分光光度法53.3.2样品总黄酮含量测定53.4单因素试验53.4.1乙醇浓度对提取效果的影响53.4.2超声波提取时间对提取效果的影响53.4.3料液比对提取效果的影响53.4.4超声波仪温度对提取效果的影响63.5正交试验64结果与分析74.1总黄酮的测定74.1.1绘制标准曲线74.2单因素试验结果84.2.1乙醇浓度对提取效果的影响84.2.2超声波提取时间对提取效果的影响84.2.3料

3、液比对提取效果的影响94.2.4温度对提取效果的影响104.3正交试验结果104.4金银花各部分的黄酮提取与含量测定124.4.1实验方法124.4.2结果与分析135结论与展望14参考文献1511前言金银花是我国传统的中药植物,具有清热解毒、凉风散热、抗病毒、保肝利胆等功能,是主治痈肿疔疮.喉痹,丹毒,热毒血痢,风热感冒,温病发热的常用药材。[1]金银花叶中的黄酮类化合物有木犀草、忍冬苷等。经研究表明,不同时期的金银花修剪各部位均含有黄酮,节部和叶片含量最高,花中次之,茎中含量较低[2]。金银花越冬老叶中黄酮含量

4、约为药用金银花的2.78倍、忍冬藤的6.98倍。[3]黄酮上述分布特征提示了金银花叶和节部可能是较好药用部位,但是金银花叶片一直被视为非药用部位而长期未得到充分利用。根据我国16各省市和自治区的158个市、县的202个金银花商品样品的研究,共鉴定出其原植物分属于忍冬属14个种1个亚种和2个变种,其中以忍冬分布最广、质量最高。金银花的产量以山东省最丰,品质则以河南省为上乘。河南、山东是金银花的传统和地道产地。[4]根据上述文献资料,可见金银花枝叶的药源比金银花丰富,分布广泛并且采集容易,价格相对便宜,应该充分利用。黄

5、酮类化合物(Flavonoid),又称生物类黄酮,广泛存在于自然界中,约1/4的植物中含有黄酮,已知化学结构的黄酮类化合物近5000种,其数量居天然酚类物质之首,广泛存在于植物的各个部位,主要存在于芸香料、唇形科、豆科、伞形科、银杏科与菊科中。据研究,约20%的中草药中含有黄酮类化合物,来源非常广泛。[5]黄酮具有抗癌防癌、延缓衰老、增强心血管功能、增强机体免疫功能、抑菌抗病毒和抗炎镇痛等药理活性,是多种中药材的有效成分。我国研究的124种防治气管炎药物中,就有69种含有黄酮类化合物,黄酮类化合物的作用比较温和,在

6、治疗心血管系统和慢性气管炎等新药的寻找方面占一定地位。[6]在食品工业中,黄酮类物质还可以作为抗氧化剂、天然色素和甜味剂使用。有关文献对桑叶、银杏、葛根、竹类、水芹及大豆等植物黄酮提取工艺的研究成果较多,但是金银花枝叶提取黄酮的工艺研究成果较少。本实验探讨了金银花干叶中黄酮类物质的最佳提取工艺,以求为金银花植物进一步开发利用提供理论依据。111仪器与材料金银花干叶、干枝、鲜叶、鲜枝、干花;亚硝酸钠;硝酸铝;氢氧化钠;蒸馏水;芦丁对照品(中国药品生物制品检定所);试剂瓶;胶头滴管;150ml具塞三角瓶;25ml具塞比

7、色管;100ml容量瓶;500ml抽滤瓶;玻璃棒;移液管(0.5ml、1ml、2ml、5ml);漏斗;比色管架;KQ-500E型超声波清洗器;V-1200型紫外可见分光光度计;真空抽滤泵等(试剂均为分析纯)。2实验方法2.1样品预处理金银花干枝、干叶和干花样品用粉碎机粉碎,过60目筛干燥保存备用,鲜枝、鲜叶样品在使用前用粉碎机粉碎,不可长时间保存应现制现用。2.2试剂配制本实验需要使用50g/L的亚硝酸钠溶液、100g/L的硝酸铝溶液和10g/L的氢氧化钠溶液。具体配制方法如下:称取5.0g亚硝酸钠,用水溶解后定容

8、到100ml即可得到50g/L的亚硝酸钠溶液,保存于试剂瓶中备用;称取10.0g硝酸铝,用水溶解后定容到100ml即可得到100g/L的硝酸铝溶液,保存于试剂瓶中备用;称取10.0g氢氧化钠,用水溶解后定容至1L即可得到10g/L的氢氧化钠溶液,保存于非磨口试剂瓶中备用。2.2.1配制芦丁标准应用液称取0.2000g(精确至0.0002g)芦丁对照品(已知质

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