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《大豆论文:大豆 锌指蛋白 gmc2h2 转录因子 转基因拟南芥》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、大豆论文:大豆转录因子GmC2H2基因转化拟南芥效果分析【中文摘要】锌指蛋白(zincfingerprotein)是一类具有“指状”结构域的转录因子,主要功能是调控基因的表达,锌指蛋白种类较多,但以C2H2型最多。C2H2型锌指蛋白基因最早在非洲爪蟾中发现,植物中发现的第一个C2H2型锌指蛋白基因是在矮牵牛中分离得到的ZPT2-1,之后陆续在矮牵牛、拟南芥、棉花、大豆、水稻等植物中相继分离到了该类型的锌指蛋白基因,并发现在植物中都含有QALGGH高度保守序列,而动物锌指蛋白中不存在。已有的研究发现C2H2型锌指蛋白主要参与植物的生长发育以及调控植物的抗逆性。本研究的GmC2H2转录因
2、子基因是依据GenBank中大豆EST数据库的保守序列,设计特异性的引物,利用PCR、RT-PCR等技术获得的一个cDNA开放阅读框序列,它是大豆中一个编码经典C2H2型锌指蛋白的基因,并在Genbank中注册,其登陆号为:DQ055134。该基因全长765bp,开放阅读框长度为516bp,其编码172个氨基酸的锌指蛋白,分子量约为19KD。在本实验室前期研究的基础上,将GmC2H2基因的全长编码序列分别构建到16318hGFP亚细胞定位载体上,将16318hGFP-Gm...【英文摘要】Zincfingerproteinisakindoftranscriptionfactortha
3、thasafingerstructuraldomain,anditcanregulatethegeneexpression.Therearevarioustypesofzincfingerproteins,butmostofthembelongtotheC2H2-type.C2H2typezincfingerproteinwasfirstdiscoveredinXenopustropicalis,andaC2H2zincfingerproteingenenamedZPT2-1whichwasisolatedfromthepetuniawasfirstfoundinplants,and
4、thegeneofthistypezincfingerproteinhavegraduallybeenisolatedfromthepetunia,Arabidopsi...【关键词】大豆锌指蛋白GmC2H2转录因子转基因拟南芥【英文关键词】SoybeanZincfingerproeinGmC2H2TranscriptionfactorTransgenicArabidopsisthalian【索购全文】联系Q1:138113721Q2:139938848同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发【目录】大豆转录因子GmC2H2基因转化拟南芥效果分析摘要6-7Abstract7
5、-8第一章绪论16-251.1植物转录因子研究进展16-171.1.1转录因子16-171.1.2植物抗逆相关转录因子171.2植物锌指蛋白的研究进展17-181.2.1锌指蛋白的结构和分类171.2.2植物锌指蛋白的功能17-181.3非生物胁迫下植物的应答机制18-241.3.1低温胁迫下植物的应答特征18-191.3.2高盐胁迫下植物的应答特征19-201.3.3ABA处理下植物的应答特征20-221.3.4干旱胁迫下植物的应答特征22-241.4立题目的意义241.5技术路线24-25第二章GMC2H2序列分析及植物载体构建25-392.1试验材料25-262.1.1菌种及载
6、体252.1.2酶及生化试剂252.1.3试剂盒252.1.4引物252.1.5测序252.1.6培养基的配制252.1.7主要仪器设备25-262.1.8引物设计和序列分析软件262.2超表达载体的构建26-292.2.1PCR262.2.2PCR产物的回收26-272.2.3连接反应272.2.4感受态的制备272.2.5重组质粒的转化272.2.6质粒DNA的提取27-282.2.7酶切检测282.2.8DNA序列测定282.2.9酶切回收282.2.10连接转化282.2.11阳性克隆鉴定及测序28-292.3亚细胞定位表达载体的构建292.3.1PCR292.3.2亚细胞定
7、位表达载体的构建292.3.3原生质体的瞬时转化292.4RNA干扰载体的构建29-312.4.1中间干扰载体的构建29-302.4.2最终干扰载体的构建30-312.5突变体表达载体的构建312.6结果与分析31-392.6.1目的基因分析312.6.2植物表达载体的构建31-322.6.3亚细胞定位表达载体的构建及亚细胞分析32-342.6.4RNA干扰载体的构建34-372.6.5突变体表达载体的构建37-39第三章转基因拟南芥阳性苗的获得39-48