芥菜锌指蛋白转录因子基因Bj26的克隆与鉴定-论文.pdf

《芥菜锌指蛋白转录因子基因Bj26的克隆与鉴定-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、作物学报ACTAAGRONOMICASINICA2014，40(7)：1174—1181http：／／zwxb．chinacrops．org／ISSN0496—3490；CODENTSHPA9E—mail：xbzw@chinajourna1．net．cnDoI：1O．3724／SP．J．1006．2014．01174芥菜锌指蛋白转录因子基因Bj26的克隆与鉴定贾双伟，高英，赵开军，中国农业科学院作物科学研究所／农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程，北京100081摘要：锌指蛋白是一类重要的转录因子家族，参与植物基因转录调

2、节、发育及胁迫反应等生理过程。我们前期研究发现芥菜诱导型启动子BjC．P的W-box．1ike一4为其真菌诱导的核心元件，本研究通过酵母单杂交技术从芥菜cDNA文库中筛选到与W-box—like．4序列特异互作的转录因子基因26。生物信息学分析表明，26含735bp的开放阅读框，编码一个新的C2H2型锌指蛋白，包括2个典型的C2H2型锌指结构及2个植物特有的QALGGH氨基酸保守序列，等电点pI为9．2，分子量为26．6kD。亚细胞定位显示该蛋白位于细胞核。本氏烟瞬时表达分析表明Bj26蛋白通过与B-jC—P的真菌诱导核心元

3、件序列特异互作，激活启动子Bjc—P。实时荧光定量PCR结果显示，26在真菌诱导下表达量明显增高。Bj26的CDS序列与拟南芥和水稻中的C2H2型锌指蛋白序列比对及进化树分析表明，Bj26与拟南芥的C2H2型蛋白同源性高于水稻。以上结果揭示Bi26蛋白可能介导BiC．P真菌诱导响应并参与植物抗真菌病原菌的调控过程。关键词：酵母单杂交；C2H2锌指蛋白；Bj26基因；真菌诱导；瞬时表达；实时荧光定量PCRCloningandCharacterizationofBrassicajunceaZincFingerProteinTra

4、n—scriptionFactorGene嘲26JIAShuang．Wei，，GAOYing，，andZHAOKai—Jun，NationalKeyFacilityf0rCropGeneResourcesandGeneticImprovement／InstituteofCropScience．ChineseAcademyofAgriculturalSciencesBeijing100081，ChinaAbstract：Zinc—fingerproteins，forminganimportanttranscriptionalf

5、actorfamily,areinvolvedingenetranscriptionalregulation，developmentandstress—responsesinplants．ThepreviousstudiesrevealedthatBjC—Pisafungus-induciblepromoterfromBras—sica／unceaandW-box．1ike一4isthecoreelementresponsivetofungalinfection．Here．wereportthemolecularclonin

6、gandchar—acterizationofazincfingerprotein—encodinggene(designated6)．Bj26wasscreenedoutfromtheBrassicajunceacDNAlibrarybytheYeastOne．HybridSystem．BioinformaticanalysisshowedthatBj26containsopenreadingflameof735bpthatencodesanewC2H2typezincfingerproteinwithanisoelect

7、ricpoint(pI)of9．2andamolecularweightof26．6kD．Theproteinconsistsoftwotypicalzinc—fingerdomainsandcontainstwoconservedQALGGHaminoacidsequences．Subcellular1ocalizationshowedthatBi26islocatedinthenuclear~ThehistochemicalandquantitativeGUSassays，throughtransientgeneexpr

8、essioninNicotianabenthamianalear,showedthatB26canbindtothecoreelememW-box．1ike一4andactivatethefunctionofBiC—PaIPCRanalysisshowedthatthegeneB／26ex