资源描述：
《芥菜锌指蛋白转录因子基因bj26的克隆与鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、作物学报ACTAAGRONOMICASINICA2014,40(7):1174−1181http://zwxb.chinacrops.org/ISSN0496-3490;CODENTSHPA9E-mail:xbzw@chinajournal.net.cnDOI:10.3724/SP.J.1006.2014.01174芥菜锌指蛋白转录因子基因Bj26的克隆与鉴定1,∗∗1,∗∗1,∗贾双伟高英赵开军中国农业科学院作物科学研究所/农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程,北京100081摘要:锌指蛋白是一类重要的转录因子家
2、族,参与植物基因转录调节、发育及胁迫反应等生理过程。我们前期研究发现芥菜诱导型启动子BjC-P的W-box-like-4为其真菌诱导的核心元件,本研究通过酵母单杂交技术从芥菜cDNA文库中筛选到与W-box-like-4序列特异互作的转录因子基因Bj26。生物信息学分析表明,Bj26含735bp的开放阅读框,编码一个新的C2H2型锌指蛋白,包括2个典型的C2H2型锌指结构及2个植物特有的QALGGH氨基酸保守序列,等电点pI为9.2,分子量为26.6kD。亚细胞定位显示该蛋白位于细胞核。本氏烟瞬时表达分析表明Bj26蛋
3、白通过与BjC-P的真菌诱导核心元件序列特异互作,激活启动子BjC-P。实时荧光定量PCR结果显示Bj26在真菌诱导下表达量明显增高。Bj26的CDS序列与拟南芥和水稻中的C2H2型锌指蛋白序列比对及进化树分析表明,Bj26与拟南芥的C2H2型蛋白同源性高于水稻。以上结果揭示Bj26蛋白可能介导BjC-P真菌诱导响应并参与植物抗真菌病原菌的调控过程。关键词:酵母单杂交;C2H2锌指蛋白;Bj26基因;真菌诱导;瞬时表达;实时荧光定量PCRCloningandCharacterizationofBrassicajunce
4、aZincFingerProteinTran-scriptionFactorGeneBj261,∗∗1,∗∗1,∗JIAShuang-Wei,GAOYing,andZHAOKai-JunNationalKeyFacilityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement/InstituteofCropScience,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100081,ChinaAbstract:Zinc-fingerproteins,
5、forminganimportanttranscriptionalfactorfamily,areinvolvedingenetranscriptionalregulation,developmentandstress-responsesinplants.ThepreviousstudiesrevealedthatBjC-Pisafungus-induciblepromoterfromBras-sicajunceaandW-box-like-4isthecoreelementresponsivetofungalinfe
6、ction.Here,wereportthemolecularcloningandchar-acterizationofazincfingerprotein-encodinggene(designatedBj26).Bj26wasscreenedoutfromtheBrassicajunceacDNAlibrarybytheYeastOne-HybridSystem.BioinformaticanalysisshowedthatBj26containsopenreadingframeof735bpthatencodes
7、anewC2H2-typezincfingerproteinwithanisoelectricpoint(pI)of9.2andamolecularweightof26.6kD.Theproteinconsistsoftwotypicalzinc-fingerdomainsandcontainstwoconservedQALGGHaminoacidsequences.SubcellularlocalizationshowedthatBj26islocatedinthenuclear.Thehistochemicalan
8、dquantitativeGUSassays,throughtransientgeneexpressioninNicotianabenthamianaleaf,showedthatBj26canbindtothecoreelementW-box-like-4andactivatethefunctionofBjC-P.qRT-PCR
