浆膜腔积液细胞学检查质量控制.doc

《浆膜腔积液细胞学检查质量控制.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、浆膜腔积液细胞学检查质量控制【关键词】肿瘤;细胞学技术;浆膜腔积液浆膜腔积液常作为某些疾病的伴随症状或首发症状出现，临床常通过浆膜腔积液检查鉴别积液的良恶性、明确病因。目前，浆膜腔积液细胞学检查找到肿瘤细胞，仍是鉴别浆膜腔积液良恶性的一种快速、准确、可靠和经济的首选方法。因常规离心沉淀法检出肿瘤细胞的阳性率仅为33%～60%左右[12]，所以多年来，浆膜腔积液细胞学检查方法不断创新和加强各环节质量控制以提高肿瘤细胞的检出率，受到越来越多的临床实验室的关注。　　1分析前的质量控制　　1.1标本采集　　1.1.1采集方式对大量浆膜腔积液者应留取

2、最后抽出、带有较多浆膜腔脱落细胞的积液做细胞学检查。薛立福介绍[3]，在胸腔积液采集中可将先抽入注射器的积液再快速推向胸腔底部，反复数次后抽取送检，可使肿瘤细胞检出率由50%左右提高为80.3%。　　1.1.2抗凝采集脱落细胞学检查标本时应加入抗凝剂，一般多为肝素300U/100mL标本，或用109mmol/L枸橼酸钠(标本与抗凝剂比例为10∶1)，是提高肿瘤细胞检出率的一个重要环节而不可忽视。　　1.2送检　　1.2.1送检标本量送检标本量直接关系到可收集到的肿瘤细胞量，多数研究者建议为200mL左右。李志忠等[4]将116例胸腔积液标本分

3、为100～300mL组与5～10mL组做对比，结果肿瘤细胞检出率分别为83.6%与46.6%，差异显著(P<0.005);抽出不足100mL者送检5～10mL，肿瘤细胞检出率仅为14.3%，除标本量过少外，也与患者的病情相关。李亚红等[5]将250mL标本静置30min后取底层积液5mL离心沉淀，肿瘤细胞检出率为83.3%，如不静置检出率为52%。值得关注的是不少文献报道不管送检标本量多少，只取5～20mL离心沉淀[1，3，5]。笔者建议留取新鲜标本100～200mL全部离心沉淀，保证收集到尽量多的肿瘤细胞，这是提高肿瘤细胞检出率的一个

4、关键环节。静置一定时间后取底层标本离心沉淀，虽肿瘤细胞检出率与离心沉淀100～300mL标本一致，但因时间延长，细胞形态改变而影响细胞识别及诊断，不应作为最佳选择。　　1.2.2送检时间7高自芳等[6]采用图像分析仪对离体后室温放置15min、30min、60min、90min、120min后的浆膜腔积液细胞形态进行分析，发现15min组细胞结构清晰，核着色深、染色质及核膜清楚;30min与60min组细胞略增大，结构尚清晰，染色质较15min组模糊而核膜尚清;90min与120min组细胞面积明显增大，结构模糊不清，部分细胞破碎，特别是12

5、0min组的细胞面积是15min组的3倍。因此认为15min内完成送检、处理、固定最佳，而60min内完成送检、处理、固定仍尚可。考虑送检及实验室内标本处理、固定用时，30min内送检、60min内完成标本处理和固定为必须。　　1.2.3送检次数增加送检次数可提高肿瘤细胞检出率，各文献报道结论一致[14]，三次及三次以上送检与一次送检肿瘤细胞的检出率差异具有显著性(P<0.01)。　　2分析过程的质量控制　　2.1肿瘤细胞收集　　目前常用的浆膜腔积液细胞学检查5种收集方法，其方法学的创新和质量控制目的均为提高肿瘤细胞收集率。　　2.1

6、.1常规离心沉淀法离心沉淀的相对离心力(RCF)和血性积液的处理是该方法的两个关键质控环节。①不同研究中离心沉淀所用转速、时间各异，转速500～3500r/min、离心时间5～30min不等。但多数文献未说明离心机的有效离心半径，所以RCF(g)不明[RCF(g)=1.118×10-5×有效离心半径(cm)×(r/min)2]。尿沉渣检查离心RCF为400g/5min，温氏法血细胞比容测定RCF为2260g/30min，分离乏血小板血浆RCF为1570g/10min，分离血清RCF为1010g/5min左右。恶性浆膜腔积液70%以上为浆液性[

7、7]，其粘稠度大于尿液而小于血液，浆膜腔积液中肿瘤细胞体积又大于红细胞。因此，收集积液中肿瘤细胞时的RCF为1000g左右较为合适，时间根据浆膜腔积液性状选择5～10min。目前国产离心机大部分有效离心半径为14～15cm，RCF1000g时，转速为2500r/min左右。离心沉淀既要避免RCF过小和离心时间过短收集不到肿瘤细胞，又要避免过大和时间过长导致细胞形态异常变化和破碎。②血性积液直接涂片，肿瘤细胞检出率仅为11%[7];离心后取白膜层制片[811]肿瘤细胞检出率50%左右;许成英[11]用草酸铵1.2g、90%酒精30mL、甘油1

8、0mL加水至100mL低渗溶液与胸水1∶1破坏红细胞后，肿瘤细胞检出率由52%提高为86%;支喜兰[12]比较了蒸馏水、6g/L氯化钠溶液和低渗氯化钾+甲醇+冰醋酸