浆膜腔积液细胞学检查质量控制论文

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1、浆膜腔积液细胞学检查质量控制论文.freelL标本，或用109mmol/L枸橼酸钠(标本与抗凝剂比例为10∶1)，是提高肿瘤细胞检出率的一个重要环节而不可忽视。1.2送检1.2.1送检标本量送检标本量直接关系到可收集到的肿瘤细胞量，多数研究者建议为200mL左右。李志忠等4将116例胸腔积液标本分为100～300mL组与5～10mL组做对比，结果肿瘤细胞检出率分别为83.6%与46.6%，差异显著(P0.005);抽出不足100mL者送检5～10mL，肿瘤细胞检出率仅为14.3%，除标本量过少外，也与患者的病情相关。李亚红等5将250mL标本静置30min后取

2、底层积液5mL离心沉淀，肿瘤细胞检出率为83.3%，如不静置检出率为52%。值得关注的是不少文献报道不管送检标本量多少，只取5～20mL离心沉淀1，3，5。笔者建议留取新鲜标本100～200mL全部离心沉淀，保证收集到尽量多的肿瘤细胞，这是提高肿瘤细胞检出率的一个关键环节。静置一定时间后取底层标本离心沉淀，虽肿瘤细胞检出率与离心沉淀100～300mL标本一致，但因时间延长，细胞形态改变而影响细胞识别及诊断，不应作为最佳选择。1.2.2送检时间高自芳等6采用图像分析仪对离体后室温放置15min、30min、60min、90min、120min后的浆膜腔积液细胞形

3、态进行分析，发现15min组细胞结构清晰，核着色深、染色质及核膜清楚;30min与60min组细胞略增大，结构尚清晰，染色质较15min组模糊而核膜尚清;90min与120min组细胞面积明显增大，结构模糊不清，部分细胞破碎，特别是120min组的细胞面积是15min组的3倍。因此认为15min内完成送检、处理、固定最佳，而60min内完成送检、处理、固定仍尚可。考虑送检及实验室内标本处理、固定用时，30min内送检、60min内完成标本处理和固定为必须。1.2.3送检次数增加送检次数可提高肿瘤细胞检出率，各文献报道结论一致14，三次及三次以上送检与一次送检

4、肿瘤细胞的检出率差异具有显著性(P0.01)。2分析过程的质量控制2.1肿瘤细胞收集目前常用的浆膜腔积液细胞学检查5种收集方法，其方法学的创新和质量控制目的均为提高肿瘤细胞收集率。2.1.1常规离心沉淀法离心沉淀的相对离心力(RCF)和血性积液的处理是该方法的两个关键质控环节。①不同研究中离心沉淀所用转速、时间各异，转速500～3500r/min、离心时间5～30min不等。但多数文献未说明离心机的有效离心半径，所以RCF(g)不明RCF(g)=1.118×10-5×有效离心半径(cm)×(r/min)2。尿沉渣检查离心RCF为400g/5min，温氏法血细胞

5、比容测定RCF为2260g/30min，分离乏血小板血浆RCF为1570g/10min，分离血清RCF为1010g/5min左右。恶性浆膜腔积液70%以上为浆液性7，其粘稠度大于尿液而小于血液，浆膜腔积液中肿瘤细胞体积又大于红细胞。因此，收集积液中肿瘤细胞时的RCF为1000g左右较为合适，时间根据浆膜腔积液性状选择5～10min。目前国产离心机大部分有效离心半径为14～15cm，RCF1000g时，转速为2500r/min左右。离心沉淀既要避免RCF过小和离心时间过短收集不到肿瘤细胞，又要避免过大和时间过长导致细胞形态异常变化和破碎。②血性积液直接涂片，肿瘤

6、细胞检出率仅为11%7;离心后取白膜层制片811肿瘤细胞检出率50%左右;许成英11用草酸铵1.2g、90%酒精30mL、甘油10mL加水至100mL低渗溶液与胸水1∶1破坏红细胞后，肿瘤细胞检出率由52%提高为86%;支喜兰12比较了蒸馏水、6g/L氯化钠溶液和低渗氯化钾+甲醇+冰醋酸溶液3种破坏红细胞的效果，结果为低渗氯化钾+甲醇+冰醋酸溶液红细胞破坏完全而有核细胞形态保持最好。2.1.2脑脊液细胞玻片离心沉淀器法进行浆膜腔积液细胞学检查，标本用量仅为0.1～0.5mL，低速离心而细胞收集率高，损失少;制片好，细胞形态保持完整易于观察，避免了常规高速离心

7、导致的肿瘤细胞发生变形破碎的可能13。张纪云等14取静置后底层的浆膜腔积液用该法检查40例恶性积液，肿瘤细胞检出率为97.5%，而常规离心法为80%，两种方法相比差异有显著性(P0.05)。该法质控需注意各步骤操作准确和离心速度不能过快。2010年2月张树平等：浆膜腔积液细胞学检查质量控制第1期2010年2月河北北方学院学报(医学版)第1期2.1.3密度梯度离心法朱任之等1516将抽取的胸腔积液离心沉淀后，以适量PBS混悬后，加到两倍量的淋巴细胞分离液(比重1.055)的表面，2000r/min离心15～20min，收取细胞分离液表面细胞层检查，并依检测结果

8、决定检测次数，最多3次。36例恶性胸腔