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1、------精品文档!值得拥有！------响应面法优化绿色木霉H06产孢发酵培养基梁昌聪，刘磊，张建华，王伟伟，黄俊生﹡(中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业部热带作物有害生物综合治理重点实验室/海南省热带农业有害生物检测与控制重点实验室，海南海口571101)摘要:采用响应面法对绿色木霉H06菌株产孢发酵培养基进行了优化。首先利用Plackett－Burman实验设计筛选出影响产孢的3个主要因素:玉米粉、大豆粕和KH2PO4。在此基础上运用最陡爬坡路径法逼近最大响应值区域，最后利用响应面分析法确定主要因子之间的交互作用及最
2、佳条件。结果表明，蔗糖10g/L，玉米粉12.75g/L，NH4NO32g/L，大豆粕4.65g/L，MgSO4·7H2O1g/L，KH2PO43.32g/L，H06最大理论孢子含量为3.29×109个/mL。经3次平行实验验证，实际平均孢子含量与预测孢子含量相近，比之前的孢子含量提高了197%。关键词：响应面法，绿色木霉，产孢，优化OptimizationofmediumcomponentsforsporulationquantitybyTrichodermaviridestrainH06usingresponsesurfaceme
3、thodologyLIANGChangCong,LIULei,ZHANGJianHua,WANGWeiWei,HUANGJunSheng﹡(EnvironmentandPlantProtectionInstitute，CATAS/KeyLaboratoryofIntegratedPestManagementonTropicalCrops,MinistryofAgriculture/HainanKeyLaboratoryforMonitoringandControlofTropicalAgriculturalPests，Haikou57
4、1101)Abstract:ThefermentationmediumcomponentsforsporulationquantitybyTrichodermaviridestrainH06wasoptimizedbyresponsesurfacemethodology(RSM).Firstly,threeofthemostsignificantinfluencefactorswerescreenedbythemethodofPlackett－Burmandesignascornmeal,soybeanmealandKH2PO4.Th
5、epathofsteepestascentwasappliedtoapproachtheoptimalregionofthethreesignificantfactors.Lastly,theoptimalconcentrationandcorrelationsamongthreefactorswereidentifiedbyRSM.Theoptimalfermentationconditionsweredeterminedasfollowed:sucrose10g/L,cornmeal12.75g/L,NH4NO32g/L,soyb
6、eanmeal4.65g/L,MgSO4·7H2O1g/L,KH2PO43.32g/L.Undertheseconditionsconditions，themaximumtheoreticsporenumberwas3.29×109/mL.Afterthreeparallelverifications，themaximumtheoreticvaluewasconsistentwithmeanvalueofverificationtestandthesporenumberwasincreasedby197%comparetothatbe
7、foreoptimization.Keywords:RSM;Trichodermaviride;sporulationquantity;optimization香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌引起的一种毁灭性的土传病害，已严重危害到香蕉的生产及香蕉产业[1]。目前综合防控技术是香蕉枯萎病防治的主要手段，木霉（Trichodermaspp.）作为一种重要的植病生防菌一直受到普遍关注。绿色木霉菌(Trichodermaviride)广泛地分布于自然界,可在多种营养基质上快速生长,对多种植物病原菌有重寄生作用,，注意书写规范能有效地竞争营养和生存空
8、间,，还可以产生抗生素和攻击多种病原所需要的酶，所以被认为是一种很有开发潜力的生防菌[2]。绿色木霉菌H06（Trichodermaviride拉丁名第二次出现用缩写T.viride）是中国热带农业科学院环境与植物保护研
