响应面法对栗蘑多糖液体发酵培养基的优化

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1、响应面法对栗蘑多糖液体发酵培养基的优化摘要：该文采用统计学方法对栗蘑虹灰1号菌株进行液体发酵配方优化，以得到适合栗蘑多糖发酵的最佳培养基配比。以栗蘑多糖含量为指标，首先采用前期单因素实验得出的6个因素，再进行Plackett-Bumrman设计筛选出影响栗蘑多糖含量的关键因素，通过响应面法确定关键因素的最佳用量和配比。结果表明：栗蘑菌株虹灰1号液体发酵培养基的最佳配方为：黄豆粉15g/L、玉米粉17.25g/L、葡萄糖20g/L、磷酸二氢钟2.237g/L、硫酸镁2g/L、蛋白胨5.88g/L,并在pH自然、25°C、140r/min条件下培养，比优化前产量提高了76.0

2、3%。关键词：栗蘑；胞外多糖；发酵优化；响应面分析中图分类号S567文献标识码A文章编号1007-7731(2016)14-0030-05Abstract：TheobjectiveofthepresentstudywastheoptimizationofliquidfermentationmediumforproducingpolysaccharidebyChestnutmushroombythesinglefactortestsandresponsesurfacemethodology.Overallresearchwasprecededbyrationaldesign

3、.TechnologicalconditionparametersweredeterminedaccordingtoregressionanalysisbyDesign-Expert7.1.6.TheRSMisfeasibleforoptimumextractionprocessandthiswillimprovetheliquidfermentationmediumforproducingpolysaccharide.Theoptimumconditionwasasfollows：soybeanpowder15g/L，cornflour17.25g/L,glucose2

4、0g/L,KH2PO42.237g/L,MgSO42g/Landpeptone5.88g/L,pH7.0，25°C,140r/min，productionincreasedby76.03%thanbeforeoptimization.Keywords:Chestnutmushroom；Extracellularpolysaccharide；Fermentationoptimization；Responsesurfaceanalysis栗蘑，又名灰树花、舞茸，是一种集食用和药用于一体的菇类，味道和口感俱佳，并且具有良好的药效，其中栗蘑多糖具有很好的抗癌作用［1］。栗蘑多糖是

5、由葡聚糖及少量蛋白质的异聚糖复合物组成的，主要是以通过自-(1-6)糖苷键结合为主链的葡聚糖和以通过3-(1-3)糖苷键结合为主链的葡聚糖的混合活性葡聚糖。传统提取栗蘑多糖的方法是从野生栗蘑中获得，然而野生栗蘑数量有限，并且只有在达到一定树龄的老树根部才会生长，难以规模化生产［2-3］。而人工栽培栗蘑子实体同样存在生产周期长、产量有限的问题。通过现代的液体发酵培养技术可以在短时间内获到大量的栗蘑菌种的发酵产物，研宄表明，液体发酵培养得到的栗蘑菌丝体与野生或人工栽培得到的栗蘑在化学成分或生理功能上均很相似，并且发酵液中含有较多的栗蘑多糖。近年来，栗蘑多糖液体发酵的研宄取得了

6、长足进展，但由于栗蘑菌株及培养基配方等原因，使培养产物有诸多差异。为此，本研宄分别采用单因素试验、PB设计、中心组合试验以及响应面法，系统全面地对栗蘑多糖液体发酵培养的培养基配方进行了优化，以期筛选出最佳的培养基配方，从而对栗蘑多糖的发酵生产提供指导［4］。1材料与方法1.1菌种与试剂菌种：栗蘑试管菌种（购自唐山食用菌社）。试剂：土豆，黄豆，玉米粉（均购自同达森客超市）；葡萄糖，磷酸二氢钟，硫酸镁，硝酸铵，氯化铵，硫酸铵（均为分析纯），蛋白胨，酵母粉，实验室已具有。1.2仪器与设备KDM型控温电热套（山东鄄城华鲁仪器公司），生化培养箱（上海跃进医疗器有限公司；型号SPX-

7、250），手提式蒸汽灭菌器（江阴滨江设备有限公司），电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司），100g手提式高速中药粉碎机（温岭市林大机械有限公司），超净工作台（上海智诚；型号ZHJH-C1112B），恒温震荡培养器（上海智诚；型号ZWY-100D），电热鼓风干燥箱（上海博讯；型号GZX-9146MBE）。1.3方法1.3.1试验流程及操作要点菌种的活化-＞种子液的制备一单因素试验一响应面法优化培养条件一验证试验。具体步骤为：先将菌种在PDA培养基上活化，并用摇床培养法制备种子液，条件为25°C、140r/min。种子液制备好后进