四种表面活性剂对蚕豆根尖细胞微核的诱发作用研究

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1、四种表面活性剂对蚕豆根尖细胞微核的诱发作用研究摘要：[目的]研究了十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、十二烷基硫酸钠(SDS)、咪唑啉型表面活性剂和聚乙二醇辛基苯基醚(TX-10)等四种表面活性剂对蚕豆根尖细胞微核的诱发作用。[方法]以蚕豆根尖细胞为材料，用0.01mg/ml、0.10mg/ml、0.50mg/ml及1.00mg/ml四个不同浓度的表面活性剂CTAB、SDS、咪唑啉型、TX-10对蚕豆根尖细胞进行微核诱发试验，以蒸馏水处理为对照。[结果]CTAB、SDS及咪唑啉型表面活性剂在实验浓

2、度范围内均能诱发蚕豆根尖细胞微核率显著提高(P<0.01)，TX-10对蚕豆根尖细胞微核率的影响不显著(P>O．05)；CTAB对蚕豆根尖细胞微核的诱导效应最高，TX-10最低，SDS及咪唑啉型表面活性剂的诱导效应居于CTAB和TX-10之间；蚕豆根尖细胞微核率与CTAB、SDS和咪唑啉型表面活性剂的使用浓度呈现明显的剂量效应关系，但SDS浓度为1.00mg/ml时微核率下降；[结论]CTAB、SDS及咪唑啉型表面活性剂能够敏感地诱发蚕豆根尖细胞微核率的提高，具有一定的遗传毒理学效应；TX-10

3、对蚕豆根尖细胞的遗传毒理学效应不明显。遗传毒理学效应应成为表面活性剂使用安全性评价的一个重要指标。关键词：表面活性剂；遗传毒理学；蚕豆；微核率表面活性剂是一类具有很强的表面活性、能使液体的表面张力显著下降的化工产品，其应用范围几乎遍及工业生产的各个领域，因此被称作为“工业味精”[1]。根据分子结构特性可将表面活性剂分为阳离子型、阴离子型、两性型和非离子型四种类型[2]。2005年，全球表面活性剂的使用量已经超过了1250万吨，并且呈现快速增长的趋势。在日常生活中，人们与之接触的机会很多，诸如牙膏

4、、皂类、餐具洗涤剂、洗衣粉、洗手液、洗发香波及日用化妆品中均含有丰富的表面活性剂，在洗涤剂中加人一定量的表面活性剂可增强其溶解性和洗涤性，但这些表面活性剂会对皮肤产生明显的刺激作用[3]。表面活性剂的广泛使用，还会对生态系统产生潜在的危害，其中有关表面活性剂的使用安全性问题备受关注[2，4]。目前对表面活性剂的毒理学研究多限于动物的急性或慢性毒性试验及对动物皮肤、眼睛的刺激性研究，而有关表面活性剂遗传毒理学的研究开展甚少。蚕豆根尖细胞微核技术是进行遗传毒理学研究的有效手段，可用于检测化学品对生物

5、的遗传毒害，具有简便、快速、重复性好和灵敏度高的优势，而且其检测结果与动物实验结果具有很高的一致性。近年来这一技术在遗传毒理学领域和环境污染监测方面应用较多[5，6，7]7。本实验研究了常用的四种表面活性剂对蚕豆根尖细胞微核的诱发作用，并探讨了研究表面活性剂遗传毒理学效应的意义。1材料与方法1．1蚕豆(Viciafaba)选用市售白皮蚕豆。1．2表面活性剂阳离子型表面活性剂：十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)(上海化学试剂公司)；阴离子型表面活性剂：十二烷基硫酸钠(SDS)(日本进口，广州化学试剂

6、公司分装)；两性型表面活性剂：咪唑啉型表面活性剂(上海裕利化工厂)；非离子型表面活性剂：聚乙二醇辛基苯基醚(TX-10)(上海裕利化工厂)。以上试剂均购自福州市化工原料商店。1．3主要仪器PYX-250Q-A型人工气候箱，OLYMPUS双目摄影显微镜，CFX-908型显微镜数码新视窗。1．4实验方法1.4.1处理液的制备四种表面活性剂均用蒸馏水配制成0.01mg/ml、0.10mg/ml、0.50mg/ml及1.00mg/ml四个不同浓度的溶液，共16组处理液。同时用蒸馏水做空白对照。1.4.2

7、蚕豆根尖制备洗净蚕豆种子，置28℃人工气候箱内用蒸馏水浸种催芽，24小时后置于铺有湿纱布的托盘内，在28℃下培养3天，待根长到2-3厘米时备用。1.4.3染毒与修复选取发育良好、根长一致的蚕豆，将根部插入带孔的培养板中，置于上述各实验处理液及蒸馏水(对照组)中，使根尖完全浸入，28℃下培养6小时，之后用蒸馏水清洗根尖两次，再换入新鲜蒸馏水修复培养22小时。1.4.4固定与保存剪下上述各处理根尖，以新配制的卡诺氏液(无水乙醇：冰乙酸=3：1)固定24小时后转入70％酒精中，置4℃冰箱保存备检。1.

8、4.5制片与观察统计取固定好的根尖，用1mol/L盐酸在60℃水浴下水解20分钟，后经Schiff试剂染色，常规制片镜检。每组处理至少观察5个根尖，每个根尖至少观察1000个细胞，统计含微核的蚕豆根尖细胞，计算微核率。微核判定标准为：存在于胞质中，呈圆形或椭圆形，其折光率及颜色与主核一致，大小为主核的1／10—1／30。1.4.6数据分析各表面活性剂处理诱发的微核率与对照组的显著性比较用t检验测定；同一表面活性剂不同浓度处理的微核率差异以及同一浓度不同表面活性剂处理的微核率差异用DPS分析软件进