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时间:2018-07-18
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1、转基因植物及其产品检测通用要求转基因植物及其产品检测通用要求转基因植物及其产品检测通用要求转基因植物及其产品检测通用要求转基因植物及其产品检测通用要求转基因植物及其产品检测通用要求转基因植物及其产品检测通用要求转基因植物及其产品检测通用要求转基因植物及其产品检测通用要求 前言 本标准由中华人民共和国农业部科技教育司提出。 本标准起草单位:中国农业科学院植物保护研究所、中国农业科学院生物技术所、农业部科技发展中心、中国农业大学。 本标准主要起草人:彭于发、王锡锋、李宁、张大兵、罗云波、黄昆仑、汪其怀、贾士荣。 本标准为首次发布
2、。 转基因植物及其产品检测通用要求 1范围 本标准规定了转基因植物及其产品检测的通用要求及转基因植物PCR检测实验室的操作规范。 本标准适用于转基因植物及其产品中转基因成分的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件,其随后所有的修改单或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件,其最新版本适合于本标准。 GB/T15481-2000检测和检验实验室能力的通用要求 GB/T6682分析实验
3、用水规格和试验方法 NY/T673转基因植物及其产品检测抽样 NY/T674转基因植物及其产品检测DNA提取和纯化 NY/T675转基因植物及其产品检测大豆PCR方法 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 一般术语Generalterms 转基因生物geneticallymodifiedorganism(GMO) 通过基因工程技术改变基因组构成的生物。包括转基因植物、动物和微生物。 转基因植物geneticallymodifiedplantorganism(GMP),transgenicplant 通过基因工
4、程技术改变基因组构成的植物,是转基因生物的一类。 定性检测极限detectionlimit 以转基因生物提取的DNA或标准双链DNA分子作为PCR反应的模板,所能检测到的脱氧核糖核酸的极限。 与DNA提取和纯化相关的术语TermsrelativetoextractionandpurificationofDNA DNA提取DNAextraction 将DNA从一个样品的多种组分中分离出来。 DNA纯化DNApurification 获得不含PCR反应抑制因子的DNA。 与DNA扩增和PCR技术相关的术语Termsrela
5、tivetoDNAamplificationandtothePCR technique DNA扩增DNAamplification 体外放大DNA分子拷贝数的生物学方法,如PCR。 扩增子amplicon 由PCR等DNA扩增方法产生的DNA片段。 聚合酶链式反应polymerasechainreaction, 模板DNA经高温变性为单链,在DNA聚合酶和适宜温度下,两条引物分别与模板DNA两条链上的一段互补序列发生退火,并在DNA聚合酶的催化下以四种dNTP 为底物,使退火引物延伸从而合成DNA,如此变性、退火和合成
6、DNA反复循环,使位于两段已知序列之间的DNA片段呈几何倍数扩增。 引物primer 一定长度和顺序的寡核苷酸链。 筛查检测法detectionbyscreening 用多种转基因植物共有的标记基因、表达调控序列等通用元件对被检产品中是否含有转基因成分进行PCR检测的方法。 身份检测法detectionbyidentification 与标准品比较确定GMO身份的检测方法。 靶序列(目的DNA)targetsequence(targetDNA) PCR反应中检测特异性扩增的DNA序列。 旁邻片段(边界序列)borde
7、rfragment(borderregion,bordersequence) 插入在染色体上的外源基因序列和宿主生物基因组片段连接的DNA片段。 终点法分析endpointanalysis 一种定性、定量的分析方法,如ELISA-PCR,可对PCR反应的扩增子进行定性和定量分析。 实时分析real-timeanalysis 一种贯串PCR反应过程,对PCR扩增效率、扩增情况及数据进行监控的定量PCR分析方法,如荧光探针的杂交过程的监控。 连接片段junctionfragment 两个不同功能基因序列之间的连接序列或片段。
8、 与对照相关的术语Termsrelativetocontrols GMO阳性对照GMOpositivecontrol 用于PCR扩增的标准目的DNA或转基因植物源材料的DNA分子。 GMO阴性对照GMOnegat
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