NYT672-2003转基因植物及其产品检测通用要求.pdf

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1、NY/T672-2003月组台本标准由农业部科技教育司提出。本标准起草单位:中国农业科学院植物保护研究所、中国农业科学院生物技术所、农业部科技发展中心、中国农业大学。本标准主要起草人:彭于发、王锡锋、李宁、张大兵、罗云波、黄昆仑、汪其怀、贾士荣。本标准首次发布。NY/T672-2003转基因植物及其产品检测通用要求范围本标准规定了转基因植物及其产品检测的通用要求及转基因植物PCR检测实验室的操作规范。本标准适用于转基因植物及其产品中转基因成分的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用

2、于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T15481-2000检测和校准实验室能力的通用要求GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法NY/T673转基因植物及其产品检测抽样NY/T674转基因植物及其产品检测DNA提取和纯化NY/T675转基因植物及其产品检测大豆定性PCR方法术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1一般术语generalterms3.1.1转基因生物geneticalymodifiedorganism(GMO)通过基因工程技术改变基因组构成的生物。包括转基因植物、动物和微生物

3、。3.1.2转基因植物geneticallymodifiedplantorganism(GMP),transgenicplant通过基因工程技术改变基因组构成的植物，是转基因生物的一类。3.1.3定性检测极限detectionlimit以转基因生物(如种子)提取的DNA或标准双链DNA分子作为PCR反应的模板，所能检测到的脱氧核糖核酸(DNA)的极限(需要确保阳性样品的纯度，才能达到本标准检测方法的灵敏度)。3.2与DNA提取和纯化相关的术语termsrelativetoextractionandpurificationofDNA3.2.1DNA提取DNAextraction将DNA从一个样

4、品的多种组分中分离山来。3.2.2DNA纯化DNApurification获得不含PCR反应抑制因子的DNA.NY/T672-20033.3与DNA扩增和PCR技术相关的术语termsrelativetoDNAamplificationandtothePCRtech-nique3.3.1DNA扩增DNAamplification体外放大DNA分子拷贝数的生物学方法，如PCR,3.3.2扩增子amplicon由PCR等DNA扩增方法产生的DNA片段。3.3.3聚合酶链式反应(PCR)polymerasechainreaction模板DNA经高温变性为单链，在DNA聚合酶和适宜温度下，两条引物分

5、别与模板DNA两条链上的一段互补序列发生退火，并在DNA聚合酶的催化下以四种dNTP(deoxyribonucleosidetriphos-phate，脱氧核昔三磷酸)为底物，使退火引物延伸从而合成DNA，如此变性、退火和合成DNA反复循环，使位于两段已知序列之间的DNA片段呈几何倍数扩增。3.3.4引物primer一定长度和顺序的寡核昔酸链。3.3.5筛查检测法detectionbyscreening用多种转基因植物共有的标记基因、表达调控序列等通用元件对被检产品中是否含有转基因成分进行PCR检测的方法。3.3.6身份检测法detectionbyidentification与标准品比较确定

6、GMO身份的检测方法。3.3.7靶序列(目的DNA)targetsequence(targetDNA)PCR反应中检测特异性扩增的DNA序列。3.3.8旁邻片段(边界序列)borderfragment(borderregion,bordersequence)插人在染色体上的外源基因序列和宿主生物基因组片段连接的DNA片段。3.3.9终点法分析endpointanalysis一种定性、定量的分析方法，如ELISA-PCR，可对PCR反应的扩增子进行定性和定量分析。3.3.10实时分析real-timeanalysis一种贯串PCR反应过程，对PCR扩增效率、扩增情况及数据进行监控的定量PCR分

7、析方法，如荧光探针的杂交过程的监控。3.3.11连接片段junctionfragment两个不同功能基因序列之间的连接序列或片段。3.4与对照相关的术语termsrelativetocontrols3.4.1GMO阳性对照GMOpositivecontrolNY/T672-2003用于PCR扩增的标准目的DNA或转基因植物源材料的DNA分子。3.4.2GMO阴性对照GMOnegativecontrol用于PC