氨肽酶n抑制剂毛细管电泳在线筛选方法的研究-药学专业论文

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1、优秀毕业论文分类号：R9单位代码：10422密级：公开学号：201114095∥▲东岁，吞lSHANDONGUNIVERSITY硕士学位论文ThesisforMasterDegree(专业学位)论文题目：氨肽酶N{q]$1J剂毛细管电泳在线筛选方法的研究ONLINESCREENINGOFAMINOPEPTIDASENINHIBITORSBYCAPILLARYELECTROPHORESIS培养单位药学院专业名称药学指导教师王唯红教授合作导师2015年5月14日精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优

2、秀毕业论文IllllllllllllllllllIILIIIllIIlllUlllllIllI原创性声明Y2794758本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名：盥日期：塑堕：垒兰厶关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门

3、或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：至；蜀盆导师签名：垒匿毽日期：出迩皇：2曼精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文山东大学硕士学位论文目录中文摘要lABSTRACT．．．．．．．．．．．．．．．．．．4符号说明8前言91氨肽酶N与肿瘤的关系91．1降解细胞外基质，促进原发肿瘤的生长侵袭转移91

4、．2促进肿瘤细胞新血管生成．102氨肽酶N抑制剂．．1l2．1APN的天然抑制剂112．2APN的小分子合成类抑制剂123氨肽酶N及其抑制剂的活性测定方法一124毛细管电泳法在酶反应动力学研究中的应用134．1毛细管电泳在酶反应测定中的应用模式．134．2电泳调控微分析法在酶反应测定中的应用．145毛细管电泳法在药物与细胞膜作用研究中的应用175．1细胞膜与药物的相互作用．175．2细胞膜毛细管电泳法．176本课题研究目的及主要内容l7第一章氨肽酶N抑制剂电泳调控微分析筛选方法的研究和应用191仪器与材料20】

5、．1仪器．201．2材料一201．3电泳条件．202实验方法21精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文山东大学硕士学位论文2．1溶液的配制．212．2毛细管柱的维护．222．3EMMA步骤222,4氨肽酶N活性研究232．5氨肽酶N抑制剂抑制动力学研究及抑制剂的筛选232．6酶标法．243结果与讨论253．1检测波长的选择．253．2分离条件的优化与选择．253．2．1电泳分离模式的选择263．2．2分离缓冲液中脱氧胆酸钠浓度的考察273．2．3分离缓冲溶液HEPES浓度的考察．283

6、．2．4分离缓冲溶液pH影响293．2．5电泳温度的考察303．2．6分离电压的考察303．3EMMA条件的优化313．3．1混合条件的选择313．3．2酶促反应时间的考察333．3．3底物浓度的考察343．4方法验证．353．5氨肽酶N的K。和V。。的测定363．5．1酶标法测定氨肽酶N的K。和V。。363，5．2EMMA法测定氨肽酶N的Km和Vm觚．363．6阳性抑制剂APN抑制动力学分析363．7抑制剂筛选．393．7．1初筛39精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文山东大学硕士

7、学位论文3．7．2复筛413．7．3筛选结果分析424小结．43第二章氨肽酶N细胞膜毛细管电泳法的建立与药物筛选451仪器与材料451．1仪器451．2材料．461．3电泳条件．462实验方法462．1溶液的配制．462．2细胞培养．482．3细胞膜的制备．492．3．1细胞膜的分离提取492．3．2细胞膜破碎方法的考察492．3．3细胞膜表征502．4细胞膜CE法一512．5模型的验证．512．6细胞膜APN动力学参数测定522．7精密度考察．522．8抑制剂的筛选．523结果与讨论。533．1细胞膜制各．5

8、33．1．1细胞膜分离提取533．1．2细胞膜的表征543．2筛选模型的验证。553．3测定细胞膜表面氨肽酶N的K。．．58精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文山东大学硕士学位论文3．4精密度考察．583．5抑制剂筛选．583．5．1初筛～583．5．2复筛604小结．6l全文总结。63参考文献．65致{射．．73攻读学位期间发表的学术论文．74精品参考文献