乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸的gc-ms分析

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1、乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸的GC-MS分析第3l卷第2期2007年4月南昌大学(理科版)JournalofNanchangUniversity(NaturalScience)Vo1.3lNo.2Apr.2007文章编号:1006~0464(2007)02—0150—04乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸的GC—MS分析王维亚,田颖刚,谢明勇,吴红静,唐永富(南昌大学食品科学教育部重点实验室,江西南昌330047)摘要:用氯仿:甲醇(2:1)超声提取乌骨鸡总磷脂,丙酮脱油精制后,经皂化,甲酯化处理,应用Gc—Ms联用技术对其侧链脂肪酸组成进行分析,并以面积

2、归一法,计算各脂肪酸的相对百分含量.结果显示,乌骨鸡总磷脂中含有硬脂酸27.46%,花生四烯酸21.39%,油酸18.22%,亚油酸16.67%,棕榈酸12.13%,二十二碳六烯酸(DHA)2.26%,二十碳三烯酸1.71%,棕榈油酸0.16%.不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的含量分别为6o.41%和42.03%.乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸中高比例的多不饱和脂肪酸和花生四烯酸含量是乌骨鸡磷脂的显着特征.关键词:乌骨鸡;磷脂;脂肪酸;气相色谱一质谱中图分类号:TS201.2文献标识码:A乌骨鸡(Gallusgallusdomesticusbri

3、sson)是我国特有的药用保健鸡种,主产于江西省泰和县.乌骨鸡药用历史已有千余年,传统中医理论认为乌骨鸡能"补肝肾,益气血,强筋骨,续绝伤;活血,调经,止崩带,治妇女百病."现代研究表明乌骨鸡含有丰富.的蛋白质,脂肪,胡萝卜素,乌骨鸡黑素等营养成分J.磷脂是脂肪的重要组成部分,具有抗衰老,防动脉粥样硬化,调节血糖,神经调节及智力开发等生理功能.作为膜的结构和功能单位,磷脂以其规律的结构维持细胞的正常形态,同时也是膜上的各种脂类依赖性酶起催化作用时不可缺少的物质基础.磷脂含量和结构的改变将引起有关酶活性,受体功能和膜通透性的变化J,进而

4、影响机体的代谢和功能.磷脂的脂肪酸组成影响着膜的结构和功能HJ,尤其是多不饱和脂肪酸(PUFAs)对于维持膜上酶的正常活性,膜的流动性和渗透性起着重要的作用.研究表明膳食中补充n一3系列脂肪酸能改变红细胞膜的结构,从而增加血红细胞的变形能力.目前关于乌骨鸡磷脂类成分分析鲜有文献报道.气一质联用技术既有气相色谱高分离效能,又能对不明化合物进行准确快速的质谱定性,定量分析卜引,是测定乌骨鸡总磷脂侧链脂肪酸组成的适宜方法.本文脂肪酸甲酯化处理中以三氟化硼为催化剂,提高了甲酯化效率,缩短了反应时问,共分离和鉴定了8种脂肪酸,测出多不饱和脂肪酸

5、占总脂肪酸的含量为42.03%,该实验结果为研究乌骨鸡磷脂的补益,药用功能提供了一定的理论参考价值.1材料与方法1.1材料与试剂乌骨鸡(Gallusgallusdomesticusbrisson),75—90d日龄,雌雄各半,由深圳生物谷集团江西泰和乌鸡原种鸡场提供;氯仿,甲醇,丙酮,正己烷,氢氧化钾,三氟化硼,氯化钠等均为分析纯;Folch溶剂:氯仿一甲醇(2:1);氮气,高纯氦气(龙口华东气体有限公司).1.2仪器美国Agilent6890型气相色谱与5973型质谱联用仪(美国Agilent公司);KQ一50超声波清洗器(昆山市超

6、声仪器有限公司);AnkeTGL一16C离心机(上海安亭科学仪器厂);FJ一200高速分散均质机(上海标本模型厂);DS一1高速组织捣碎机(上海标本模型厂);旋转蒸发仪RE一52(上海亚荣生化仪器厂).1.3实验方法1.3.1乌骨鸡磷脂的提取与精制取泰和乌骨鸡200只,宰杀,去毛,内脏,洗净,割取鸡肉,用绞肉机绞成肉泥,反复两次搅拌均匀.从大量肉泥的不同部位取样,混合均匀,用组织捣碎机捣碎.称取约100g肉泥加入2倍的Folch溶剂高速匀浆后,超声提取30min(频率:40kHz,功率:50w),离心收集收稿日期:2006—09—10

7、基金项目:教育部长江学者和创新团队发展计划资助项目(IRT0540),江西省农业科技重点攻关资助项目(2005);南昌大学测试基金资助项目(2005029)....作者简介:王维亚(1982一),女,硕士生,通讯作者:谢明勇(1957一),男,博士,教授,博士生导师,E—mail:myxie@ncu.edu.crl第2期王维亚等:乌骨鸡磷脂侧链脂肪酸的GC—MS分析提取液;残渣加2倍的Folch溶剂超声提取二次,每次30min,温度控制在25℃以下.合并滤液,用无水Na:SO脱水,氮气保护下回收溶剂,得乌骨鸡总脂质提取物.将总脂质提取

8、物逐滴加入到不断搅拌的冷丙酮中,析出沉淀后离心,得不溶物即乌骨鸡磷脂,磷脂得率为5.26mg?g鲜肉.1.3.2样品甲酯化精确称取乌骨鸡磷脂0.4g,加入0.5mol?L~KOH—MeOH2mL,氮气保护下60℃水浴l5

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