从噬菌体表面展示环状肽肽库中筛选葡萄球菌b型肠毒素抑制剂

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1、从噬菌体表面展示环状7肽肽库中筛选葡萄球菌B型肠毒素抑制剂  作者：李韩平，周宏，郑玉玲，邓小红，马茹，姜永强【关键词】 葡萄球菌B型肠毒素嗵Screeningin雍hibitorofSta若phylococcale鄂nterotoxinBf仂romrandomcir鼐cular7merpep躜tidelibraryd阶isplayedonph蛸age【Abstract】 AIM: Toob煜tainthespeci瞠ficpeptidewh缔ichcanbindwithSEBandinhi撄bitSEBsenterotoxinacti

2、vi蠲tybypanningf陂romtherandom逮circular7mer蹩polypeptidel甥ibraries.METㄥHODS: Theaff德inityofpepti蜒deandthecompetitiveactivityofthesynt钳heticpeptidewiththatofan淅tiSEBmonoclo肓nalantibody(簖McAb)weredet携ectedrespect貂ivelybyPhage惋ELISAandcomp沱etitionELISA黎.Animalexper铮imentwasper

3、f绢ormedtoasses劂sthesuppressｌiveeffectoft吒hescreenedpe醐ptideontheto豹xicityofSEBa礁nditsenterot千oxin.RESULTS茅:Thecircular夔7merpeptideo≥btainedbypan帜ningsuppress涑edthemultiplicationofspl舜eenlymphocyt毡esinmice.Att汩heratioof160え:1(SEB:synth烦etic7merspep堇tide),thepep新tideprotecte

4、dthelittleca哲tsfromattack恣ofenterotoxiⅵnandthesurvi躏valrateofmic镍9/9etreatedwith元thescreenedp莸eptidewassig烯nificantlyhi然ghercompared蒙withthatofth触econtrolgrou莺p.CONCLUSION蒉: Theobtaine弗dpeptidespec煽ificallycombineswithSEBa鳖ndsuppresses酾itsenterotox吠inactivity,w珏hichpavest

5、hewayforthedev脔elopmentofSE荞Binhibitors.【Keywords】 s舰taphylococca爷lenterotoxin去B; peptideli仨brary; scree氘ning; inhibi潼tor【摘要】 目的：箪拟通过生物淘选从噬菌体表棣面展示环状7肽肽库中筛选出与葡萄球菌B型肠毒素(涔Staphylococcㄠalenterotoxi遥nB,SEB)结合并能抑呔制该毒素毒性效应的特异性　短肽.方法：采用Phag驿eELISA来鉴定所得目噶的肽的亲和性；利用竞争E芑LISA研究合成肽与SE持

6、BmAb竞争结合SEB的岱情况；通过动物实验考察其卑抑制SEB的超抗原特性和瓢肠毒活性情况.结果：筛选啁所得短肽在一定浓度范围内┑可以抑制SEB对鼠脾淋巴夜细胞的激活；合成肽与SE赓B质量比160∶1下，合杩成肽可较好地抑制SEB对吕乳猫的肠毒活性，并对SE攮B引起的小鼠致死具有明显租保护作用.结论：得到了能唿与SEB特异结合并能抑制┖SEB超抗原特性和肠毒活锆性的短肽.【关键词】 款 葡萄球菌B型肠毒素；肽宏库;筛选;抑制剂0引言9/9葡萄球菌B型肠毒素(St酉aphylococcal杞enterotoxinB遥,SEB)［1］是超抗原正(

7、SAg)家族的主要成员鼢之一，该毒素可以造成食物莉中毒，严重时甚至导致致死乌性休克. SEB中毒后缺填乏特异的治疗手段，因此研衔究SEB的特异高效抑制剂具有重大的意义.我们利用崛固相筛选方法，即以SEB镪作为亲和靶标蛋白，从环状7mer肽噬菌体文库中筛班选到与SEB结合，并能抑怀制该毒素毒性效应的噬菌体克隆.结果表明，所筛选环状7mer肽在细胞水平上泓可抑制SEB对小鼠脾细胞的激活，在整体动物水平上¤对SEB导致的毒性具有一绺定保护作用.1材料和方烂法材料环状7mer肽⒇噬菌体文库(Randomcircular7mer尹spept

8、idelibr脱arydisplayed漩onphage)为New翰EnglandBioLabsInc产品;M13噬菌体单链DNA提取试剂盒怿为Qiagen公司