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《硼酸盐缓冲液制备尿酸酶复合脂质体及尿酸酶的特性》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、·268·doi10.3969/j.issn.1673-4254.2015.02.23JSouthMedUniv,2015,35(2):268-271基础研究硼酸盐缓冲液制备尿酸酶复合脂质体及尿酸酶的特性12111周云莉，杨林，晏子俊，邓雪，张景勍12重庆医科大学药物高校工程研究中心，重庆400016；重庆医药高等专科学校药学系，重庆401331摘要：目的研究硼酸-硼砂缓冲液制备的尿酸酶-过氧化氢酶脂质体（BUCLP）中尿酸酶的体外特性。方法采用逆向蒸发法制备BUCLP，并考察其部分理化性质特性。结果BUCLP中尿酸酶最
2、适温度保持在40℃，最适pH值由8.5降为8.0，而Km值也由14.207μmol/L降为13.623μmol/L；尿酸酶-过氧化氢酶（UAC）与空白纳米脂质体作用后，再与FITC结合，其荧光强度高于游离UAC与FITC结合的荧光强度，且BUCLP在280nm处的荧光强度高于游离UAC。结论尿酸酶和过氧化氢酶联合制备成BUCLP后尿酸酶的活性增加。关键词：尿酸酶；过氧化氢酶；脂质体；米氏常数；荧光图谱Preparationandcharacterizationofuricaseinuricase-catalaselipo
3、somespreparedusingboratebufferZHOUYunli1,YANGLin2,YANZijun1,DENGXue1,ZHANGJingqing11MedicineEngineeringResearchCenter,KeyLaboratoryofBiochemical＆MolecularPharmacology,ChongqingMedicalUniversity,Chongqing400016,China;2ChongqingMedicalandPharmaceuticalCollege,Chong
4、qing401331,ChinaAbstract:ObjectiveTocharacterizethepropertyofuricaseloadedinuricase-catalaseliposomes(BUCLPs)preparedusingboratebuffer.MethodsBUCLPswerepreparedusingreverse-phaseevaporation,andthephysicochemicalpropertiesofuricaseinthepreparedBUCLPswereexamined.R
5、esultsTheoptimaltemperatureofBUCLPandURIwas40ºC,theiroptimalpHvalueswere8.0and8.5,andtheirMichaelis-Mentenconstantswere14.207μmol/Land13.623μmol/L,respectively.Fluorescenceintensityofnanoliposome-loadeduricase-catalasethatboundtoFITCwashigherthanthatofuricase-cat
6、alasebindingdirectlywithFITC;thefluorescenceintensityofBUCLPwashigherthanthatoffreeuricase-catalaseat280nm.ConclusionUricaseactivityisenhancedafterloadinginuricaseandcatalaseliposomes.Keywords:uricase;catalase;liposomes;michaelis-mentenconstand;fluorescencespectr
7、um尿酸酶（uricase,URI）是生物体内嘌呤代谢途径中文章中有报道，本文主要研究BUCLP的体外性质。的关键酶，可以专一性催化氧化尿酸生成尿囊素、过氧［1］化氢等。但由于人体缺乏尿酸酶，只能将尿酸作为终1材料和方法产物由肾脏排出体外。血液中过量积累尿酸会导致痛1.1试剂与材料［2］风、高尿酸血症等高尿酸综合症状。在临床上目前治产朊假丝酵母尿酸酶、牛肝过氧化氢酶、异硫氰酸疗高尿酸血症的药物屈指可数。尿酸酶在降尿酸水平荧光素均购自美国Sigma-Aldrich公司；尿酸购自英国［3］时，产生的过氧化氢有细胞毒性。而过氧
8、化氢酶AlfaAesar公司；大豆卵磷脂购自德国LucasMeyer公［4］（catalase,CAT）可降解H2O2。王娜等研究尿酸酶脂质司；胆固醇（广州天马精细化工厂）；其余试剂均购自重［5］纳米粒，陈炎等研制了过氧化氢酶固体脂质纳米粒，庆川东化工集团有限公司［6］Yoshimoto等研究了葡萄糖氧化酶和过氧化氢
