榨菜线粒体qrs的提取

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1、浙江大学学报!农业与生命科学版"#$!%"&%#’(%#)*#+++,-./012-345678109:08;6/<8=>!?@ABCDEFBGHICBD"文章编号&’++LKJ#+J!#+++"+%K+%#’K+)榨菜线粒体QRS的提取陈学军’’##*陈竹君*张耀洲*金勇丰!’D浙江大学园艺系*浙江杭州%’++#JT#D浙江大学生物化学研究所*浙江杭州%’++#J"摘要&利用蔗糖衬垫法从榨菜胞质雄性不育系及保持系中分离出了线粒体UV?*琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度分析表明*所提取的UV?可用于后续的研究工作*即作为WXY模板*进行榨菜胞质雄性不育相关特异片段扩增

2、及Y?WUP关键词&榨菜T线粒体UV?T提取中图分类号&I$%)D#TZ#))TZN#%文献标识码&?’’##X[V]^HK_^‘*X[Vab^K_^‘*a[?VcdefKgbf^*hiVdf‘@KGH‘@!’DjklmDnopnqmrstumtqk*vwkKxryz{

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7、然界较普性接近保持系水平的榨菜胞质雄性不育系P遍的现象P在作物杂交制种中*利用胞质雄性不XCI的母性遗传现象*使人们很自然地将线粒育系可免去人工去雄并提高杂种纯度T同时它体和叶绿体两种细胞器联系起来P故有不少学者N#()O认为*线粒体的变异是进行相关研究的也为研究细胞核与细胞质因子间相互作用提供了极好的范例*是遗传学理论研究的一个重要前提P本文报道了榨菜线粒体UV?的提取及课题P榨菜胞质雄性不育系是由陈竹君等N’O利纯化方法P用榨菜和芥菜胞质雄性不育系P结球白菜的不育源*通过’#代回交获得的经济性状及雌蕊育’材料和方法收稿日期&’JJJK+%K#$基金项目&国家自

8、然科学基金资助项目!%JLM+N’+"QDQ材料作者简介万方数据&陈学军!’JM+O"*男*山西省洪洞县人*博士供试材料为榨菜胞质雄性不育系!XCI"生D研究方向为蔬菜遗传育种P及保持系!CR"*由浙江大学园艺系提供P@66浙江大学学报G农业与生命科学版J第6A卷!"#方法脂糖凝固成块后1放入38的锇酸固定671再线粒体$%&的提取及纯化主要参考经浓度为/48cC48c?48c?/8cd48c3448./0的方法1并加以改进2的乙醇脱水1每次脱水时间为34)9:2最后用’()*+(,-!"#"!黄化苗的培养称取345榨菜种丙酮脱水34)9:2[经Z处理后的材料放入

9、丙子1置水中浸泡671使种子充分吸水2无菌超酮eVSM:?36为@e3的树脂中包埋37U之后1净台上1将种子浸入4"68的升汞中34)9:1无将此材料放入丙酮fVSM:?36为6e3的树脂中菌水漂洗6次1再浸入38的%;<=>溶液中?包埋67U再放入VSM:?36树脂中包埋过夜2对)9:1无菌水漂洗@次1最后将种子放入无菌培包埋的材料作超薄切片1并在-V]Q3644Vg1养皿中1在6AB条件下暗培养CD34E2RQA44透射电镜下观察并照相2!"#"#榨菜线粒体的提取及纯化F将一!"#"h线粒体$%&的提取及纯化F在定鲜重GHIJ的黄化苗剪成6D@K)的小段1纯化

10、后的线粒体