4.汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定

4.汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定

ID:12086013

大小:41.00 KB

页数:3页

时间:2018-07-15

4.汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定_第1页
4.汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定_第2页
4.汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定_第3页
资源描述:

《4.汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库

1、实验名称实验四汉防己中生物碱的提取、分离和鉴定实验班级实验课时间课时数10分组10实验目的:1.掌握一般叔胺生物总碱的提取和纯化方法。2.熟悉柱色谱法分离生物碱的操作技术。3.掌握生物碱的鉴定方法。实验原理:根据大多数生物碱或生物碱盐均能溶于乙醇的通性,利用乙醇提取总生物碱。利用季铵型生物碱易溶于水,不溶于亲脂性有机溶剂的性质,用溶剂萃取法分离脂溶性生物碱和水溶性生物碱;根据汉防己甲素和乙素和酸结合成盐而易溶于水,难溶于亲脂性试剂,在碱性条件下易溶于亲脂性试剂不溶于水的性质反复处理后,再利用两者在冷苯中溶解

2、度的不同,使它们相互分离。或者利用两者的极性不同,利用柱层析进行分离。汉防己甲素R=CH3汉防己乙素R=H实验试药与器材:试药:汉防己、85%乙醇、1%盐酸、氯仿、氨水、1%氢氧化钠、无水硫酸钠、氧化铝、丙酮、环己烷、甲醇、改良碘化铋钾试剂、碘-碘化钾试剂、碘化汞钾试剂、硅钨酸试剂等器材:回流装置、圆底烧瓶、分液漏斗、层析柱、漏斗、薄层板、乳钵、量筒、烧杯、试管等实验内容与方法:一、总生物碱的提取取汉防己粉末100g,置于500ml圆底烧瓶中,加85%乙醇300ml,水浴加热回流1小时,滤出乙醇提取液;药渣

3、重新加入85%乙醇200ml同法提取1次,合并两次提取液,过滤,浓缩至无醇味,成糖浆状,得到总生物碱。二、精制将上述糖浆状提取液转入烧杯中,加1%盐酸调PH为2,边加边搅拌,静置,过滤,得澄明滤液。滤液加等体积氯仿,再加氨水调PH为10以上,于分液漏斗中振摇萃取,静置分层后放出氯仿层,碱液再用氯仿萃取两次,合并氯仿液。氯仿液置于分液漏斗中,先以1%氢氧化钠溶液洗2次,再用水洗2-3次后加入约5g无水硫酸钠脱水,放置过夜,过滤,回收氯仿至少量,得汉防己总碱。三、汉防己甲素和汉防己乙素的分离1.装柱取层析柱垂直

4、固定在铁架台上,在管的下端垫入少量棉花,称取中性氧化铝100目20g,缓缓加入层析柱中,边加边轻轻振动色谱柱,使氧化铝在柱中填实均匀。2.上样取100mg汉防己总碱置于小蒸发皿中,用少量丙酮溶解,另加0.5g色谱用氧化铝(作吸附剂),搅拌均匀,并于水浴上缓缓蒸去溶剂。然后将含有样品的氧化铝装入色谱柱的上端,并盖一圆形滤纸。3.洗脱将色谱柱活塞打开,以正己烷-丙酮(4∶1)洗脱,流速控制在5ml/min,收集各流分(10ml~15ml/份)。4.检查将各流分回收溶剂,依次点于硅胶G-CMC-Na薄层板上,用氯

5、仿—丙酮—甲醇(6∶1∶1)为展开剂,展开,喷以改良碘化铋钾试剂,比较各流分的Rf值,合并相同Rf值的流分。5.结晶将合并流分的溶液浓缩至适当体积,放置,析晶,滴加少量丙酮洗涤结晶,可得汉防己甲素、汉防己乙素结晶。四、检识1.化学检识将提取的氯仿液,用1%的盐酸萃取,得盐酸溶液10毫升,分为四个小试管储存,分别在四个小试管中加入改良碘化铋钾、碘-碘化钾、碘化汞钾、硅钨酸试剂,观察各试管中的变化,记录在如下表格中。改良碘化铋钾碘-碘化钾碘化汞钾硅钨酸汉防己生物碱空白2.色谱检识色谱材料:硅胶G-CMC-Na硬

6、板点样:汉防己总碱、汉防己甲素和汉防己乙素的0.1%醇溶液展开剂:①氯仿—丙酮—甲醇(6∶1∶1)②氯仿—乙醇(10∶1)③甲苯—丙酮—乙醇(4∶5∶1)显色剂:改良碘化铋钾试剂观察记录:记录图谱及斑点颜色实验注意事项:1、提取装置的安装要小心,不能打碎仪器。2、提取总生物碱时,回收乙醇至稀浸膏状即可,过干时,当加入盐酸后会结成胶状团块,影响提取效果。3、用1%氢氧化钠溶液洗氯仿液目的是分除酚性生物碱。汉防己乙素结构中的酚羟基由于空间效应和氢键的形成,呈隐性酚羟基性质,酸性减弱,不溶于强碱溶液中,在此步骤中

7、仍留在氯仿液中。

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。