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时间:2018-07-14
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1、山楂果实中主要活性物质研究摘要:对山楂果主要活性物质的研究,首先,进行了山楂果总的液相色谱鉴定、黄酮类提取分离及生理活性探究,继而,对黄酮类代表原花青素,和三萜类代表熊果酸的化学结构、提取分离、结构鉴定(红外、紫外、质谱、核磁共振)、生理活性展开论述。关键词:山楂、原花青素、熊果酸山楂属植物为蔷薇科,分布于北温带,世界有该属植物1000余种。山楂品种复杂,《中国植物志》载:本属植物我国有17种,中国药典(2000年版规定中药山楂原植物为北山楂(Crataeguspinnatifida)和山里红(C.pinnatifid
2、aVarMajor)的果实。近年来,国内外学者对其原植物、化学、炮制、理及临床研究都有较大发展。山楂在我国是一种重要的化滞中药,经本草考证山楂之名始载于《本草纲目》,在此之前以“赤爪草’’之名始载《新修本草》,历来为药食两用之佳。近几十年来,更广泛用于治疗心血管疾病。【1】1、山楂的研究1.1山楂的化学成分山楂的主要成分是黄酮类物质,对心血管系统有明显的药理作用。目前,从山楂中分离的黄酮成分有30余种,主要有含碳键的黄酮苷类、黄酮醇及其苷类、双氧黄酮苷类、聚合黄酮类。另一类较为重要的成分是三萜类物质,有强心、增加冠脉血
3、流、改善血流循环等重要作用。此外,山楂中含有机酸如氯原酸、咖啡酸及鞣质、鞣酐、表儿茶酚、胆碱、乙酰胆碱、β谷甾醇、胡萝卜素等。其他成分有蛋白质、糖类、维生素类等。其中,黄酮类代表,以儿茶素、表儿茶素为单元的原花青素类(procyanidins,简称PC),其在标准化提取物中含量达20%左右;以及,三萜类代表,熊果酸。(本文主要介绍)1.2总黄酮提取分离方法a.提取方法:①永煎煮提取:山楂果肉30g,用蒸攘水蘸煮2次,滤过,浓缩,褥山楂浸膏。②乙醇回流提取:取山楂果肉30g,以60%乙醇阐流提取2次,每次l。5h。合并提
4、取液,圈收乙醇,褥出棱浸膏。③甲醇为溶剂,索氏提取:取山横果肉30g,戳荦醇为溶剂,用索氏提取器匿流提取4h,隧收甲醇,得山榱浸膏。④超声提取:取山楂果肉30g,加60%乙醇,超声3次,每次45min,合并提取液,回收乙醇,得山楂浸膏。b.大孔吸收树脂分离提取总黄酮:将所得山楂浸膏分别加入适量蒸馏水,搅匀,加入CaCl21g,静置过夜。离心,分别收集上清液,用氨水调pH至7~8,分别加入大孔吸附树脂柱中,调节流速5mL/min,用蒸馏水洗去杂质,以乙醇为流动相解吸附,回收乙醇,得总黄酮提取物。将水提取物稀释成含生药1g
5、/lOmL的溶液,其他提取物稀释成含生药1g/200mL的溶液,分别测定总黄酮含量。1.3山楂的结构鉴定山楂果实中活性成分分析的HPLC谱图1.未知前花青素二聚体;2.未知前花青素三聚体;3.未知前花青素四聚体;4.绿原酸;5.前花青素B2;6.异绿原酸;7.未知酚酸;8.前花青素C.;9,表儿茶素;10.未知成分;11.未知成分;12.前花青素Bs;13.金丝桃14.Isoquereitrin.1.4生理活性1.4.1心血管作用a.降血脂作用:学者对山楂黄酮调节脂质代谢作用进行了大量研究(冯凤莲等,1997),研究表
6、明山楂及山楂黄酮能显著降低血清和肝脏丙二醛(MDA)含量,增强红细胞和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)的活性。同时增强全血谷胱甘肽还原酶(GSH.Px)活性。还能显著抑制喂高脂高胆固醇饲料大鼠的血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白一胆固醇(LDL-C)和ApoB浓度,显著升高高密度脂蛋白.胆固醇(HDL-C)和ApoAl浓度,但对甘油三酯(TG)影响不大。b.降压作用:山楂黄酮、三萜酸及水解物静注、腹腔注射、十二指肠给药,对麻醉猫的血压均显示不同程度的降压效应。山楂三萜酸在20.40medkg范围以25mg/kg静注降压作用
7、最强,再加大剂量其降压效应亦不相应增加。山楂黄酮、三萜酸水解物以同等剂量(25mg/kg)静注比较,以三萜酸降压效应最明显;但产生显著降压作用之剂量以黄酮为最低(沈映君,2000)。c.舒张血管作用:山楂总黄酮可增加冠脉流量,抗实验性心肌缺氧,抗心率失常等作用,山楂提取液无论体内或体外给药均可显著抑制家兔血小板凝集性,这对冠心病等心血管疾病的防治显然是有益的(SchusslerM.,1995)。1.4.2对消化系统的作用山楂提取物有增加胃液分泌的作用,还能增加胃中酶类,所含脂肪酶可促进脂肪分解,山楂酸等可提高蛋白质分解
8、酶的活性,有助消化作用(尹卫靖,1996)。1.4.3对中枢神经系统的作用山楂能显著延长小鼠睡眠持续时间。小鼠腹腔注射山楂2.59/kg(按生药计)20min后,给予戊巴比妥钠,观察小鼠睡眠持续时间。结果发现对照组31.8±20.1rain,山楂组88.3±38.9min。用药组和对照组比较(P
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