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《靶向her2neu基因小干扰rna对肺腺癌》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、中华结核和呼吸杂志2006年1月第29卷第1期ChinJTubercRespirDis,January2006,Vol.29,No.1·35··论著·靶向Her2/neu基因小干扰RNA对肺腺癌Calu23细胞株药物敏感性的影响任淑华张林王井伟田海梅曲平张伟【摘要】目的探讨转染靶向Her2/neu基因小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)对肺腺癌Calu23细胞株药物敏感性的影响。方法实验分4组,未转染对照组、空载体组、非特异性siRNA组、Her2/neusiRNA组,实验重复5次。即用Her2/neu基因的特异性siRNA和非特异性siRNA通过阳离子脂质体L
2、ipofectAMINE2000分别转染Calu23细胞。采用流式细胞仪(FCM)检测各组Calu23细胞Her2/neu蛋白和P糖蛋白(P2gp)的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测顺铂(DDP)对转染siRNA的癌细胞增殖水平的影响,应用膜联蛋白Ⅴ2异硫氰酸荧光素(AnnexinⅤ2FITC)凋亡试剂盒检测各组Calu23细胞的凋亡水平。结果Her2/neusiRNA组Calu23细胞Her2/neu蛋白表达的阳性率为(25104±1156)%、P2gp蛋白表达阳性率为(4124±1101)%,而未转染对照组、空载体组、非特异性siRNA组Her2/neu蛋白表达的阳性率分别为(9
3、8124±2123)%、(95167±1198)%、(94179±0187)%;P2gp蛋白表达阳性率分别为(5111±2198)%、(6198±2147)%、(5159±3166)%。Her2/neusiRNA组Calu23细胞Her2/neu蛋白表达受到明显抑制(F=112,P<0105);而P2gp的表达水平各组差异无统计学意义(F=2145,P>0105);Her2/neusiRNA联合DDP作用的细胞抑制率达(6711±213)%,而未转染对照组、空载体组及非特异性siRNA组联合DDP细胞抑制率分别为(4811±315)%、(4613±519)%及(5012±219)%,3组间抑
4、制率差异无统计学意义(F=8168,P>0105),3组分别与Her2/neusiRNA组比较差异有统计学意义(P<0101);FCM分析显示靶向Her2/neu基因特异性siRNA组Calu23细胞的DDP诱导凋亡率为(3516±314)%,明显高于未转染对照组的(818±015)%、空载体组的(916±117)%及非特异性siRNA组的(1113±118)%,差异有统计学意义(F=10168,P<0101)。结论靶向Her2/neu基因siRNA能增强肺腺癌Calu23细胞株对顺铂的敏感性。【关键词】肺肿瘤;基因,erbB22;顺铂;小干扰RNATheeffectofsiRNA2Her2
5、/neuonthedrugsensitivityofHer2/neu2overexpressinglung3adenocarcinomacelllineRENShu2hua,ZHANGLin,WANGJing2wei,TIANHai2mei,QBPing,3ZHANGWei1DepartmentofThoracicSurgery,FirstAffiliatedHospital,ChinaMedicalUniversity,Shenyang110001,ChinaCorrespondingauthor:ZHANGLin,Email:cmu_zhanglin@yahoo.com.cn【Abstr
6、act】ObjectiveToexploretheeffectofsynthesizedsiRNAtargetingHer2/neuoncogeneonthedrugsensitivityofHer2/neu2overexpressinglungadenocarcinomacellline1MethodsTheexperimentsconsistedoffourgroupsincludinganuntreatedcontrolgroup,anemptyvectorgroup,anunrelatedsiRNAgroup,andaHer2/neusiRNAgroup1Everyexperimen
7、twasrepeatedfivetimes1LungadenocarcinomacelllineCalu23wastransfectedwithsiRNAsformulatedLipofectAMINE2000,andHer2/neuproteinandP2gpofeachgroupweredeterminedbyflowcytometry(FCM)1Thechemosensitivityoftransfec
