糖尿病妇女与健康妇女阴道乳杆菌菌群特征比较

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1、糖尿病妇女与健康妇女阴道乳杆菌菌群特征比较作者：何英琳单位：广东省海丰县彭湃纪念医院妇产科，广东海丰516400【摘要】目的观察糖尿病患者与健康妇女阴道内乳杆菌属内乳杆菌分布种类，活菌数量以及产生过氧化氢（H2O2）能力的差异。方法检查60例健康妇女和60例糖尿病妇女阴道乳杆菌的分布，测定阴道乳杆菌数量与产生H2O2的能力，鉴定阴道内乳杆菌种类。结果健康妇女阴道内优势乳杆菌是嗜酸乳杆菌(44.7％)与唾液乳杆菌(19.1％)；糖尿病妇女阴道内优势乳杆菌是嗜酸乳杆菌(36.4％)与发酵乳杆菌(27.3％)。健康妇女阴道内乳杆菌检出率(78.3%)、平均活菌数量对数值（8

2、.35±1.29）和产H2O2乳酸菌比例(87.2%)均显著高于糖尿病患者（分别为18.3%，5.90±1.14和27.3%，P<0.01)。结论糖尿病患者乳杆菌菌种分布与健康妇女不同，且其乳杆菌检出率、平均活菌数量对数值和产生H2O2的能力较健康妇女均显著下降，提示糖尿病妇女中预防阴道菌群失调，防止阴道感染应引起重视。【关键词】糖尿病；乳杆菌；菌群失调乳杆菌是健康妇女阴道内最重要的优势菌属，是阴道抵抗感染的天然屏障［1～3］。有报道表明，糖尿病患者抵抗能力低下，常常发生包括阴道感染在内的各种感染［4］。糖尿病患者阴道感染除了血糖上升

3、导致的全身易感性外，阴道局部的菌群失调是否也起到了一定的作用，是我们关心的问题。本研究通过检测糖尿病患者和健康妇女阴道分泌物中的阴道乳杆菌，观察健康妇女与糖尿病阴道内乳杆菌属内各类型和亚种的变化规律，探讨糖尿病阴道感染疾病的发病机制。　　资料与方法　　1.实验材料(1)病例与分组：标本来源选自2003年11月至2007年3月在我院妇产科门诊患者，研究对象入选标准：①2周内无全身应用抗生素及阴道局部用药史。②3天内无性生活史。糖尿病诊断由两名医师询问糖尿病诊断时间、诊断医院、用药史及血糖控制情况，诊断医院至少为县级以上医院，诊断标准参照美国糖尿病协会1997年提出的诊断

4、标准，即症状+空腹血浆葡萄糖大于或等于7.0mmol/L，或随机血糖大于或等于11.1mmol/L，或口服葡萄糖耐量试验2hPG大于或等于11.lmmol/L。健康妇女60例纳入健康组，年龄20～47岁；糖尿病妇女60例纳入糖尿病组，年龄24～45岁。两组患者年龄，体重等一般情况无显著性差异。(2)试剂与器材：乳杆菌培养基(LBs)采用乳杆菌选择性培养基；H2O2鉴定培养基为MRS琼脂培养基中加入0.25mg/ml四甲基联苯胺(TMB)和过氧化物酶0.01mg/ml；APICH50乳杆菌菌种鉴定反应板采用法国梅里埃公司产品。2.实验方法(1)标本取材：用灭菌的特制不锈

5、钢长柄定量小勺，阴道后1/3处采集分泌物0.2ml，插入含1.8ml灭菌的L半胱氨酸稀释液中，尽快10倍系列稀释至10-6，分别接种于LBs，培养48h。从可计数稀释度内，调取形态、菌落进行鉴定，计数活菌数量。乳杆菌确定标准：①革兰染色阳性，无芽孢，细长弯曲或呈球杆状、杆状，单个或双链状，无动力；②微需氧，在5%～10%CO2环境下能生长，但在厌氧环境下生长更好；③生长最适温度为(30～40)℃，最适pH5.6～6.2；④触酶阴性，不产色素；⑤分解葡萄糖。(2)菌种鉴定以及产H2O2鉴定：①菌种鉴定：经过染色镜检、氧化酶、触酶阴性等初步鉴定所选菌是否为阴道乳杆菌属，

6、然后将选出的乳杆菌接种到APICH50乳杆菌鉴定系统中，按说明书进行操作。②H2O2鉴定：将选出的乳杆菌接种到H2O2鉴定培养基，当细菌产生H2O2时，过氧化物酶氧化TMB，形成蓝色菌落，证明产生H2O2阳性，记作LB(+)。3.统计学方法　　健康妇女与糖尿病妇女乳杆菌检出率，乳杆菌H2O2阳性率以百分率表示，统计学分析采用卡方检验(前者采用PearsonChiSquare，后者采用LikelihoodRatio)。活菌数量对数值用均数±标准差表示，统计分析采用独立样本t检验，所有统计分析均使用SPSS11.0软件包，以P<0.05作为有显著性差

7、异。乳杆菌属内菌株种类变化进行描述性分析。　　结果　　1.阴道内乳杆菌属内菌株种类变化　　健康妇女阴道内分离出的47例乳杆菌菌株种类分布如下：嗜酸乳杆菌21例(44.7%)、唾液乳杆菌9例(19.1%)、德氏乳杆菌4例(8.5%)、食果糖乳杆菌3例(6.4%)、发酵乳杆菌3例(6.4%)、弯曲乳杆菌2例(4.3%)、赖氏乳杆菌2例(4.3%)、食淀粉乳杆菌2例(4.3%)与干酪乳杆菌1例(2.1%)等，分离率以嗜酸乳杆菌、唾液乳杆菌为高；糖尿病妇女分离出的11例乳杆菌菌株种类分布如下：嗜酸乳杆菌4例(36.4%)、发酵乳杆菌3例(27.3%)、弯曲乳