卡托普利对白蛋白引起hk-2细胞ace-ace2表达影响

《卡托普利对白蛋白引起hk-2细胞ace-ace2表达影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、卡托普利对白蛋白引起HK-2细胞ACE/ACE2表达影响［摘要]目的观察血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)卡托普利(captopril,CAP)对白蛋白引起的肾小管上皮细胞表达ACE、ACE2及其作用产物AngⅡ的影响。方法实验分组：对照组（未干预的人近端肾小管上皮细胞株，HK-2）；牛血清白蛋白（BSA）组(10�mg•ml-1)；CAP组(10�μmol•L-1)；BSA加CAP组。分别采用实时定量RT-PCR和WesternBlot检测ACE、ACE2mRNA和蛋白的表达水平；采用放

2、射免疫法(RIA)检测细胞上清液中AngⅡ的浓度。结果实时定量RT-PCR显示，与对照组比较（相对表达量为0），CAP组ACEmRNA表达差异无统计学意义（0.27±0.09vs0，�P>0.05）；CAP能显著抑制BSA引起的ACEmRNA表达上调[（BSA+CAP）组∶BSA组为（0.80±0.05）vs（1.58±�0.20），P0.05)（图1）。�2.3CAP对BSA引起ACE2mRNA表达的影响�与对照组比较，BSA(10�mg•ml-1)作用12�h后，ACE2mRNA表达显著减少(-1

3、.35±0.13vs0,P0.05)（图2）。�2.4CAP对BSA引起ACE/ACE2蛋白表达的影响�Westernblot8显示的ACE、ACE2和actin的蛋白表达情况，见图3。BSA作用12h后ACE蛋白表达较对照组显著增加（1.2±0.10vs0.52±0.05，P0.05)（图4A）。与此同时，BSA作用12�h后ACE2蛋白表达较对照组显著降低（0.35±0.09vs1.13±0.11，P0.05）（图4B）。�2.5CAP对BSA引起AngⅡ浓度的影响�RIA结果显示，与对照组比较，BSA可显著

4、增加细胞上清液中AngⅡ的浓度[(97.25±10.4)vs(28.53±�3.5)�pg•ml-1，P0.05]（图5）。�与对照组比较,#P0.05�图5卡托普利对白蛋白引起HK-2�细胞上清液AngⅡ浓度的影响�3讨论�ACEI是最早应用于临床的RAS阻断剂，AIPRI(Theangiotensin-converting-enzymeinhibitioninprogressiverenalinsufficiencystudy)［4］和REIN(Ramiprilefficacyinnephropa

5、thy)8［5]研究均证实，ACEI不仅可以降低血压，而且可以减少蛋白尿，从而延缓慢性肾脏病的进展。肾功能正常或轻度损害的IgA肾病患者应用福辛普利一年可使蛋白尿减少36%，而7年肾存活率达92%［6］，在非糖尿病性微量白蛋白尿患者，福辛普利也被证实可非降压依赖性地降低微量蛋白尿［7］。最近不少研究提示，蛋白尿本身就是一种肾脏毒素，会导致肾组织局部RAS激活，参与肾小管间质纤维化的形成［8］。ACEI的肾保护作用是否与其通过抑制蛋白尿，进而抑制肾脏局部RAS激活是一个值得探讨的问题。�近年来越来越多的研究表明，肾

6、脏存在独立于系统RAS的局部RAS，而局部RAS的激活在CKD的进展中发挥主要作用［9］。AngⅡ是局部RAS最主要的效应因子，通过促进细胞产生生长因子、趋化因子及炎症因子等参与纤维化的进程［10］。而蛋白尿的肾毒性作用有部分是通过激活RAS而产生的。蛋白负荷可促进单侧肾切除术的大鼠近端肾小管表达肾素、ACE以及血管紧张素原增加［2］。在转染血管紧张素原基因的小鼠，出现血压升高、白蛋白尿，同时应用培哚普利(perindopril)的小鼠上述症状明显减轻［11］。�早在20世纪80年代,人们就认识到ACEI不仅能阻

7、断循环RAS、扩张全身血管而降低血压，而且可通过扩张肾小动脉使肾小球毛细血管静水压降低，而血浆流量并未减少，从而减少尿蛋白，延缓CKD的进展［12］。有研究表明，ACEI可抑制肾损伤后引起的TGF-βmRNA表达增加,并降低其转录，这提示ACEI可能通过抑制TGF-β的表达而抑制肾脏纤维化［13］。�最近研究发现，肾脏局部RAS主要有两条效应相反的代谢途径［14］。血管紧张素原在肾素作用下酶解为Ang8Ⅰ，后者再被ACE降解为AngⅡ。AngⅡ主要通过靶细胞膜上的血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1受体)发挥多种生物学效

8、应，包括收缩血管、促进组织增生、炎症反应、纤维化等。另外，AngⅠ还可被ACE2降解为Ang-(1-9)，后者再被ACE降解为Ang-(1-7)；而ACE2也可直接降解AngⅡ,形成Ang-(1-7)作用于mas受体，发挥与ACE-AngⅡ-AT1途径相反的作用，表现为舒张血管、抑制增生、抗炎和延缓纤维化［15］。因此，现在越来越多的人认为，ACE/ACE2的激活状态可能