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1、Toll样受体在S180肿瘤细胞上表达及意义【摘要】目的通过比较S180肿瘤细胞体内、体外TLRs表达的变化,探讨TLRs在肿瘤发生、发展中的作用和意义。方法①将传代培养的S180腹水癌细胞接种于ICR小鼠腹腔左侧,建立S180腹水癌模型;②采用密度梯度离心法分离纯净肿瘤细胞;③采用半定量RT-PCR方法检测S180腹水癌体外传代培养细胞与荷瘤鼠体内瘤细胞TLR1-9mRNA表达水平。结果TLR1、2、4、6在S180腹水癌体外传代培养细胞中表达水平高于荷瘤鼠体内瘤细胞;TLR7体外传代培养细胞中表达水平低于荷瘤鼠体内瘤细胞;TLR5、9体外传代培养细胞
2、中有表达,荷瘤鼠体内瘤细胞无表达;TLR3、8体外传代培养细胞与荷瘤鼠体内瘤细胞均无表达。结论S180肿瘤细胞可表达TLRs,并且不同的TLRs在体内、体外的表达有所差异,提示TLRs在肿瘤的免疫逃逸中发挥一定的作用。�【关键词】肿瘤细胞;S180腹水癌;Toll样受体TheexpressionandsignificanceofToll-likereceptoronS180cellsLIUHuao-Chuan,LIUBai-nan,LIXin,LIYi.1.SevenYearsProgramofClinicalMedicine,JilinUniversi
3、ty,MedicalCollegeofBasicScience,Changchun130021,China;2.DepartmentofImmunology,JilinUniversity,MedicalCollegeof10BasicScience,Changchun130021,China�【Abstract】ObjectiveTostudythedifferencebetweenTLRsexpressedonthesurfaceofS180cellsinvitroandinvivo,andinvestigatethesignificanceofTL
4、Rsinthegenesisanddevelopmentoftumor.Methods①TheasciticS180modelswereestablishedbyinjectedsubcutaneouslytotheleftabdominalofICRmicewithsubculturingasciticS180cells.②Separatepuretumorcellwiththemethodofdensitygradientcentrifugation.③TheexpressionofTLR1-9mRNAwereanalyzedbysemi-quant
5、itativeRT-PCR.ResultsTLR1,2,4,6expressedmoreinvitrothaninvivo;TLR7expressedmoreinvivo;TLR5,9onlyexpressesinvitro;TLR3,8neitherexpressedinvitronorinvivo.ConclusionTLRsmayexpressonthesurfaceofS180cells.Andtheexpressionsaredifferentbetweenthecellswhichgrewinvitroandinvivo.Itsuggests
6、thatTLRsmayplayrolesinthetumorevasion.【Keywords】Tumorcell;AsciticS180;Toll-likereceptors(TLRs)101997年Janeway等首次在人体分离出果蝇Toll的同系物,将其命名为TLR4。随后在人类已发现有11种TLR。Toll样受体(Toll-likereceptors,TLRs)是目前发现能识别病原微生物上的高度保守结构基序―病原相关分子模式(pathogen-associatedmolecularpatterns,PAMPs)的一组跨膜蛋白,属于白介素1受体(I
7、L-1R)超家族成员,TLRs识别的PAMPs是一类高度保守的分子结构,这些分子结构存在于细菌、真菌和病毒。TLRs与PAMPs相互作用启动相应免疫应答[1]在机体的天然免疫和获得性免疫中发挥重要作用。近年来,表达在抗原提呈细胞(antigenpresentationcells,APC)的TLRs在肿瘤免疫中的作用越来越引起人们的兴趣,包括通过应用免疫佐剂的作用来增强TLRs识别肿瘤细胞产生的“危险信号”,促进针对肿瘤的免疫应答。然而近年来,当人们在研究抗原提呈细胞表面TLRs的结构、功能及信号转导途径的同时,却发现多种肿瘤细胞表面也表达多种TLRs,并
8、且与肿瘤细胞的免疫逃逸密切相关。肿瘤细胞在体内的发生与发展是一个与免疫系统相互作