正交实验优选常春油麻藤总黄酮提取工艺的研究论文

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1、正交实验优选常春油麻藤总黄酮提取工艺的研究论文张凌刘亚丽饶志军冯军【摘要】目的研究提取常春油麻藤中总黄酮的最佳工艺条件。方法以芦丁为指标，用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色体系作为显色剂，用正交实验法对常春油麻藤总黄酮提取方法进行了系统研究。结果最佳提取工艺为30倍量60%乙醇回流3次，40min/次，常春油麻藤中总黄酮的含量为12.43%。结论乙醇浓度、料液比、回流时间和提取次数对常春油麻藤总黄酮的提取均有影响。最佳提取工艺为A2B3D1C1。【关键词】常春油麻藤总黄酮芦丁紫外分光光度法正交实验A

2、bstractObjectiveTostudytheoptimumextractiontechnologyoftotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsl.MethodsUsingRutinastheevaluatingcriteriaandNaNO2-Al(NO3)3-NaOHaschromogenicagent,theextractionconditionumextractiontechnologyin,3times.ThetotalflavonoidsinMucuna

3、sempervirensHemsleandnumberoftimeshavesignificantimpactonextractionoftotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsl.TheoptimumextractiontechnologyisA2B3D1C1.KeypervirensHemsl.;Totalflavonoids;Rutin;UV;Orthogonaldesign常春油麻藤，是丰城鸡血藤的一个品种，又名牛马藤或大血藤，是豆科植物常春油麻藤Mucunase

4、mpervirensHemsl.的藤茎。性温.freeleter(日本岛津公司)；电子分析天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）；SB3200超声波清洗仪（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；DZF-6050型真空干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；X-9146MBE数显鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；HH-S数显恒温水浴锅（江苏省金坛市医疗仪器厂）；万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。1.2材料与试剂芦丁对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号：100080-200306）；常春油麻藤

5、药材（采自于江西省南昌市湾里区梅岭山脉，由江西中医学院中药系赖学文老师采集并鉴定）；所用试剂均为分析纯。2方法与结果2.1总黄酮的测定方法2.1.1测定方法依据在黄酮类化合物的紫外光谱图上主要有两个吸收带：环肉桂酰系统引起的吸收带Ⅰ（300～550nm）和环苯酰系统引起的吸收带Ⅱ（240～280nm）。若加入铝盐，则铝离子与黄酮化合物形成稳定的配合物，带Ⅱ会明显向长波方向移动（红移）；在NaNO2的强碱性溶液中，其在500～510nm处吸光度值最大，从而为分光光度法测定提供了可靠的依据。2.1.2测定方法取4

6、个10ml容量瓶，1，2号分别加入1ml芦丁对照品溶液和1ml稀释到一定倍数的常春油麻藤溶液，各加60%的乙醇稀释至刻度，以60%乙醇为空白，在紫外分光光度计上于200～760nm波长范围内进行扫描。3，4号分别加入1ml芦丁对照品溶液和1ml稀释到与2号同样倍数的常春油麻藤溶液，加入0.15ml5%NaNO2溶液摇匀，放置6min；加入0.15ml10%Al(NO3)3溶液摇匀，放置6min；加入4ml1mol/LNaOH溶液摇匀，定容，放置0～15min，用同样方法加入显色剂的溶剂作空白，在200～760

7、nm波长范围内扫描［2］，得出吸收光谱，结果见图1。从图1可以看出，在未加显色剂以前，对照品在361nm和257nm处有最大吸收，供试品在282nm处有最大吸收，加入NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色体系后，对照品和供试品的吸收峰都发生了红移，在502nm处有最大吸收。因此，可以确定502nm为测定波长。2.1.3对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品19.84mg，置于50ml容量瓶中，加60%乙醇溶解（如不溶，置水浴上微热并短时超声使之溶解），用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，即得芦丁对照品溶液（每毫升含

8、芦丁0.992mg）。2.1.4标准曲线的制备精密量取芦丁对照品溶液0，0.2，0.5，1，1.2，1.5ml，分别置于10ml容量瓶中，加60%乙醇至2ml，然后按照“2.1.2”项中“加入0.5ml5%NaNO2溶液”起，至“放置0～15min”操作，以第一瓶溶液作空白，在502nm测定各溶液的吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，得回归方程：C=78.93A+0.201，相关系数：r=0.9