正交实验优选常春油麻藤总黄酮提取工艺的研究

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1、正交实验优选常春油麻藤总黄酮提取工艺的研究张凌刘亚丽饶志军冯军【摘要】　　目的研究提取常春油麻藤中总黄酮的最佳工艺条件。方法以芦丁为指标，用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH显色体系作为显色剂，用正交实验法对常春油麻藤总黄酮提取方法进行了系统研究。结果最佳提取工艺为30倍量60%乙醇回流3次，40min/次，常春油麻藤中总黄酮的含量为12.43%。结论乙醇浓度、料液比、回流时间和提取次数对常春油麻藤总黄酮的提取均有影响。最佳提取工艺为A2B3D1C1。【关键词】常春油麻藤总黄酮芦丁紫外分光光度法

2、正交实验　　AbstractObjectiveTostudytheoptimumextractiontechnologyoftotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsl.MethodsUsingRutinastheevaluatingcriteriaandNaNO2-Al(NO3)3-NaOHaschromogenicagent,theextractionconditionumextractiontechnologyin,3times.Thetotalflavon

3、oidsinMucunasempervirensHemsleandnumberoftimeshavesignificantimpactonextractionoftotalflavonoidsinMucunasempervirensHemsl.TheoptimumextractiontechnologyisA2B3D1C1.　　KeypervirensHemsl.;Totalflavonoids;Rutin;UV;Orthogonaldesign　　常春油麻藤，是丰城鸡血藤的一个品种，又名牛马藤或大

4、血藤，是豆科植物常春油麻藤MucunasempervirensHemsl.的藤茎。性温，味苦。具有行血活血、通经活络之功效，主治关节风湿痛、跌打损伤、血虚、月经不调及经闭。　　有文献报道，常春油麻藤中主要含有黄酮类成分，如刺芒柄花素、大豆黄素以及3,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮等〔1〕。黄酮化合物具有降血糖、降血脂、抗菌消炎、抗氧化、抗衰老、消除体内自由基等药理作用。基于黄酮类化合物是其有效成分之一。因此，研究其定量方法，不仅对了解其中黄酮成分含量以观察药物的疗效与成分间关系具有一定意义，而且对控

5、制生药质量，进一步制定其质量标准提供了依据。本文以提取物中总黄酮含量为指标，采用正交实验设计和紫外分光光度法对常春油麻藤中总黄酮的提取条件及含量测定进行了系统的研究，为进一步开发利用常春油麻藤及鸡血藤资源提供科学依据。　　1器材　　1.1仪器　　U-3000Spectrophotometer(日本岛津公司)；电子分析天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司）；SB3200超声波清洗仪（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；DZF-6050型真空干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；X-9146MBE数显

6、鼓风干燥箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）；HH-S数显恒温水浴锅（江苏省金坛市医疗仪器厂）；万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。　　1.2材料与试剂　　芦丁对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号：100080-200306）；常春油麻藤药材（采自于江西省南昌市湾里区梅岭山脉，由江西中医学院中药系赖学文老师采集并鉴定）；所用试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1总黄酮的测定方法　　2.1.1测定方法　　依据在黄酮类化合物的紫外光谱图上主要有两个吸收带：环肉桂酰系统引起的吸收带Ⅰ（300～

7、550nm）和环苯酰系统引起的吸收带Ⅱ（240～280nm）。若加入铝盐，则铝离子与黄酮化合物形成稳定的配合物，带Ⅱ会明显向长波方向移动（红移）；在NaNO2的强碱性溶液中，其在500～510nm处吸光度值最大，从而为分光光度法测定提供了可靠的依据。　　2.1.2测定方法　　取4个10ml容量瓶，1，2号分别加入1ml芦丁对照品溶液和1ml稀释到一定倍数的常春油麻藤溶液，各加60%的乙醇稀释至刻度，以60%乙醇为空白，在紫外分光光度计上于200～760nm波长范围内进行扫描。3，4号分别加入1ml芦

8、丁对照品溶液和1ml稀释到与2号同样倍数的常春油麻藤溶液，加入0.15ml5%NaNO2溶液摇匀，放置6min；加入0.15ml10%Al(NO3)3溶液摇匀，放置6min；加入4ml1mol/LNaOH溶液摇匀，定容，放置0～15min，用同样方法加入显色剂的溶剂作空白，在200～760nm波长范围内扫描〔2〕，得出吸收光谱，结果见图1。　　从图1可以看出，在未加显色剂以前，对照品在361nm和257nm处有最大吸收，供试品在282nm处有最大吸收，加入NaNO2-