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时间:2018-07-09
《维拉帕米对梗阻性黄疸大鼠肝组织核因子κb表达的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、维拉帕米对梗阻性黄疸大鼠肝组织核因子κB表达的影响:禹良国,舒新军,陶政,李杰,徐三荣【摘要】目的:探讨维拉帕米对梗阻性黄疸时肝组织核因子κB(nuclearfactorkappaB,NFκB)表达的影响。方法:将雄性SD大鼠48只随机分成胆管结扎组、维拉帕米组和假手术组。分别于术后第7天、14天处死大鼠,观察肝组织NFκBp65表达、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量以及血清肿瘤坏死因子α(TNFα)和白介素6(IL6)的变化。结果:维拉帕米组肝组织NFκBp65表达
2、、MDA含量及血清TNFα,IL6水平均明显低于胆管结扎组(P<0.05或P<0.01)。结论:维拉帕米可下调肝组织NFκB的表达,减轻梗阻性黄疸时肝损伤。【关键词】维拉帕米;梗阻性黄疸;核因子κB;肝损伤[Abstract]Objective:ToinvestigatetheeffectofverapamilonexpressionofnuclearfactorkappaB(NFκB)intheliverduringobstructivejaundice.Methods:Fortyei
3、ghtmaleSpragueDalydividedintothreegroups:bileductligationgroup,bileductligationplusverapamilgroupandshamoperationgroup.Theratseterseasured:expressionsofhepaticNFκBp65,contentsofmaleicdialdehyde(MDA)andsuperoxidedismutase(SOD)inhepatictissue,tumor
4、necrosisfactorα(TNFα)andinterleukin6(IL6)inserum.Results:ExpressionsofNFκBp65,contentsofMDAandlevelsofserumTNFα,IL6inverapamilgroupilmayprotectagainsttheliverinjuryinratsil;obstructivejaundice;nuclearfactorkappaB;liverinjury梗阻性黄疸是外科常见的临床病症,它的出现
5、导致机体各系统器官的损害以及相应的病理生理改变,肝脏为其损害的首要器官,同时它的受损更易引起后继其他器官损害和多器官功能衰竭的发生。解除胆管梗阻为治疗的根本措施,然而即使胆管引流胆红素降至正常,肝脏功能的恢复仍需较长的时间[1]。目前的研究认为核因子κB(NFκB)的活化及其调控的炎症介质的过度释放是引起梗阻性黄疸患者器官损害及术后并发症和死亡率较高的重要原因[2,3]。维拉帕米作为一种L型电压依赖性钙通道阻滞剂,广泛应用于临床心血管疾病的治疗。研究表明[4],维拉帕米可通过抑制核转录因子NF
6、κB的活化转位,从而减轻组织细胞的炎性损伤。本实验通过结扎大鼠肝外胆管制作梗阻性黄疸动物模型,观察维拉帕米对梗阻性黄疸大鼠肝脏组织NFκBp65表达的影响,以及血清肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素6(IL6)水平的变化,以探讨钙通道阻滞剂维拉帕米对肝脏损伤的保护作用。1材料与方法1.1实验动物及分组雄性SD大鼠48只(江苏大学实验动物中心提供),体质量250~300g。将大鼠随机分成3组:胆管结扎组、维拉帕米组和假手术组,每组16只。维拉帕米购于Sigma公司。1.2动物模型的建立术
7、前禁食12h,自由饮水,以氯胺酮100mg/kg腹腔注射麻醉,无菌条件下取上腹正中切口入腹,游离胆总管后用3-0号丝线双重结扎,结间横断胆总管,关闭腹腔。假手术组仅行胆总管游离,不予结扎和切断。1.3处理方法维拉帕米组术后第1天起,每天腹腔注射维拉帕米2mg/kg,直至处死。假手术组和胆管结扎组则同期腹腔注射等量生理盐水。分别于术后第7天、14天处死大鼠,下腔静脉采血,制备血清,部分用于检测肝功能,其余置-70℃冰箱保存待测TNFα和IL6。取右中叶肝组织,部分置于4%低聚甲醛溶液固定,用于常
8、规病理和免疫组化,其余置液氮保存。1.4检测指标和方法1.4.1肝功能测定采用OlympusAu2700全自动生化分析仪检测血清总胆红素(TB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)。1.4.2病理学检查取4%低聚甲醛固定的肝组织,常规脱水、石蜡包埋、切片,苏木精-伊红染色,在光镜下观察肝组织病理变化。1.4.3NFκBp65表达检测采用免疫组化Envision二步法检测,以PBS代替一抗作为空白对照。兔抗大鼠NFκBp65多克隆抗体购自CellSignal
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