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1、节律化疗联合最大耐受剂量化疗抗肿瘤作用的实验研究论文【摘要】目的探讨环磷酰胺（CTX）节律化疗联合最大耐受量（MTD）化疗对小鼠Leide（CTX）administeredbymeansofmetronomicchemotherapybinedmaximumtolerateddose（MTD）chemotherapyontheangiogenesis,carcinogenesisandmetastasisofLeousemodel.MethodThemicelydividedintofourgroups:（1）metronomicchemotherapygroup,（2）MTD
2、group,（3）binationgroup（metronomicchemotherapybinedMTDgroup）,（4）controlgroup.TriedtodeservethetumorgroetastasisofeverygroupanddetecttheexpressionofCD34,MMP-9andCXCR4intumortissueandlung.ResultsCTXadministeredbymetronomicchemotherapybinedorgroetastasisofLLC.TheMVD,lungmetastasisrate,expression
3、ofMMP-9andCXCR4ofbinationgroupandmetronomicgroupuchlootherapy,CTXadministeredbyconcurrentmetronomicchemotherapy,appearstoinhibitsignificantlytumorgroetastasisofLLC.Potentially,bymeansofdoortissue,metronomicchemotherapyperforms.【Keyetronomicchemotherapy;cyclophosphamide（CTX）;angiogenesis;matr
4、ixmetalloproteinase-9（MMP-9）;chemokinereceptor-4（CXCR4）近年来发现低剂量、高频度的节律化疗对肿瘤血管内皮细胞及其前体细胞具有破坏作用而表现出极好的抗血管生成作用。在我们以前的实验中，发现环磷酰胺（CTX）最大耐受量（MTD）化疗对小鼠Leed公司。动物：C57BL/6纯系小鼠.freell（含瘤细胞数2×106个）。1.3实验流程分组和用药：随机将荷瘤鼠分4组：（1）CTX节律化疗组：腹腔注射CTX35mg/kg，隔天1次；（2）MTD组：腹腔注射CTX150mg/kg，隔天1次，共3次，21天1周期；（3）联合组：腹腔注射
5、CTX150mg/kg，隔天1次，给药3次后休息5天，从第11天开始CTX35mg/kg，隔天1次，共5次；（4）对照组：腹腔注射生理盐水0.2ml，隔天1次。每组10只小鼠。以上各组均于肿瘤接种后第9天（瘤体400～700mm3）起连续给药20天。从接种后第9天开始，隔日测量瘤块最长径（a）和与其垂直的短径（b），按照公式V(mm3)=ab2/2计算瘤体积，绘制肿瘤生长曲线。从第9天开始，隔日称小鼠体重。第30天，处死小鼠剥离瘤体并称重。用免疫组化法染色计数肿瘤组织和肺组织内微血管密度（MVD）、MMP-9和CXCR4表达情况。1.4结果判定MVD判定标准：低倍镜下找血管密度
6、最高区，5个高倍镜视野下计数被染色血管的平均数目。任何被CD34抗体染成棕黄色的单个细胞或细胞团，不管是否形成管腔，只要与周围组织有清楚的分隔都可计数，血细胞和大的血管腔不计。MMP-9判断标准：胞浆或胞膜出现棕黄色或黄色为阳性细胞,表达强度由染色细胞数和染色深度共同评分。阳性细胞染色深度按无着色、淡黄色、棕黄色、棕褐色分别打0、1、2、3分,阳性着色面积按无着色、着色1/3、着色1/3～2/3、着色2/3分别打0、1、2、3分。两积分之和由高到低分4级,6分(+++),4～5分(++),2～3分(+),0～1分(-)。CXCR4判断标准：阳性细胞百分率:≤5%、6%～25%、
7、26%～50%、51%～75%、≥76%分别为0、1、2、3、4分；着色强度：无着色、淡黄色、黄色、棕黄色分别为0、1、2、3分，两者积分乘积：0阴性(-),1～2弱阳性(+),3～4阳性(++),≥5强阳性(+++)。［注:（-）、(+）为低表达组,（++）、（+++）为高表达组］。1.5统计学处理统计学方法应用SPSS12．0统计软件。采用方差分析和χ2检验。2结果2.1各组小鼠体重变化,处死后瘤重对照组小鼠体重增长较快,CTX节律化疗组增长缓慢,MTD组先下降后快速增长,联合组先下降后
