竹荪子实体多糖提取及化学组成

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1、竹荪子实体多糖提取及化学组成【摘要】从天然竹荪中经脱脂、采用20、40、60、80℃四个不同温度热水梯度抽提、Sevage法脱蛋白、乙醇沉淀得到四种粗竹荪多糖。对其中在60℃下提取的多糖进行研究。经测定此多糖具有较高的粘度，再对其用丙酮进行分级得到纯度较高的竹荪多糖-3。用气相色谱对其单糖组成结构进行分析，结果表明荪多糖-3是一种以葡萄糖为主的多糖，通过刚果红实验证实此多糖可能具有三螺旋结构。【关键词】竹荪多糖;分离;纯化;结构表征;链刚性【中图分类号】R284.1【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)08-

2、0008-01StudyofthepolysaccharidefromthebodyofdictyophoraduicataWANGjiatang,HUZhun（Wuhanuniversityoftechnology，Hubei，Wuhan,China，430000）【Abstract】weobtainedanewpolysaccharidefromthedictyophoraduicatafischextractionbyhotwaterat20、40、60、80℃.Thepolysaccharidewasinvestgate

3、dbyGC,viscosityandCongored,itwasindicatedthatitwascontentbytheglucan.Itsit6israreandindicatingthatithasawell-organizedhelicalconformationinaqueoussolution.【Keywords】polysaccharides;isolation;purification;characterization;polymerchain竹荪（Dictyophoraduplicata）是一种担子菌，隶属真

4、菌门（Eumycota）、担子菌亚门（Basidiomycotina）.野生竹荪分布主要在于中国贵州、云南、四川和浙江等省区竹林下的腐殖土上。竹荪目前已经可以大规模人工种植。近年来的研究发现，竹荪含有多种氨基酸、维生素、多糖和多种无机盐等[1～3]。除其营养价值外，同时还具有一定的防病保健作用。多糖是竹荪子实体中重要组成成分之一，多糖生理活性和功能已有许多报道[4～5]。林玉满，连宾等对竹荪多糖都有研究，得到的多糖都是由多种单糖组成的杂多糖，本文作者采用热水萃取、有机溶剂沉淀和丙酮分级等方法，从竹荪子实体中分离得到竹荪多糖，气相

5、色谱方法，确定了该多糖是由单一的葡萄糖组成，为深入研究竹荪多糖的化学结构和生物活性提供依据。1材料与方法1.1材料与仪器61.1.1材料与耗材实验用竹荪选用湖北省阳新县人工栽培的竹荪子实体（干品）为多糖提取材料，95％医用酒精，各种单糖标样为sigma试剂厂产品，其余试剂均为分析纯、化学纯或生化试剂。1.1.2仪器与设备Aglient6890N气相色谱仪，气相色谱仪(GC)配备HP-5毛细管柱(30m×0.25mm，0.25μm，5%phenylmethyl-siloxane)，FID检测器，U-3010Sdetrophotom

6、eter型紫外分光光度计(日本日立公司)。1.2方法1.2.1竹荪多糖的提取、分离和纯化竹荪子实体烘干切碎后称量，然后按照料液质量体积比为1：6的比例加入分析纯乙酸乙酯，95%乙醇用索氏提取器中回流提取6小时,再用用水为提取溶剂，在室温下用水浸泡过夜后，后分别在20、40、60、80℃下，子实体和水之比为1∶5提取竹荪多糖，浸提时间3～5h，共提取3次，合并3次浸提液。取60℃提取的多糖进行处理，真空减压浓缩，浓缩一倍体积。在浓缩液中加入4倍体积的乙醇（95%）搅拌，沉淀为多糖和蛋白质的混合物，此为粗多糖。上述粗多糖经Sevag

7、e法（氯仿∶异戊醇=3∶1混合摇匀）脱游离蛋白，进行粗多糖纯化。粗多糖溶液加入Sevage试剂后，恒温振荡充分，使蛋白质充分沉淀，离心（8000r/min）分离，去除蛋白质。脱游离蛋白后，经H2O2�脱色。溶液经乙醇沉淀，离心，得干燥沉淀，再经水溶解后，冷冻干燥即得较为纯化的竹荪多糖。对得到的多糖用丙酮进行分级，得到纯度较高多糖竹荪多糖-3。61.2.2紫外分析在280nm和260nm处测定紫外吸收度检测脱蛋白率。1.2.3粘度测定测定多糖溶液的粘度数据，进行相关的数据处理，采用外推法计算出特性粘度。�恒温槽温度设置25.0℃,

8、以水做为溶剂,用粘度计分别测出溶剂、多糖溶液流出的时间，根据公式：1.2.4单糖组分分析气相色谱分析:称取20mg竹荪多糖,放入具塞试管中,加入2N硫酸溶液5mL后,封管,在105℃水解8h,水解液加少量蒸馏水,用BaCO��3�中和后离心除沉淀,上清液冷冻干燥