2010沙门菌检查用培养基适用性检查记录

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1、表：2.1—057沙门菌检查用培养基适用性检查记录1、适用范围：成品培养基、由脱水培养基或按处方配制的培养基均应进行培养基适用性检查。2、验证目的：培养基适用性检查试验目的是为了确定实验室所使用培养基、制备程序、保存条件等是否满足微生物限度检查用要求。3、参照标准：《中国药典》2010年版、《中国药品检验标准操作规范》2010年版4、检查项目、菌株及判断标准培养基测试菌株测试特性测试指标营养肉汤培养基乙型副伤寒沙门菌促生长能力浑浊金黄色葡萄球菌促生长能力浑浊四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）乙型副伤寒沙门菌促生长能力上清浑浊金黄色葡萄球菌抑制能力上清未见浑浊

2、胆盐硫乳琼脂（DHL）或沙门菌志贺菌琼脂（SS）乙型副伤寒沙门菌促生长能力回收率乙型副伤寒沙门菌指示能力颜色形态同对照曙红亚甲蓝琼脂（EMB）或麦康凯琼脂（固体）大肠埃希菌促生长能力回收率乙型副伤寒沙门菌回收率大肠埃希菌指示能力颜色形态同对照乙型副伤寒沙门菌颜色形态同对照5、验证所用培养基：分类名称生产厂家批号被检培养基营养肉汤培养基四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）胆盐硫乳琼脂（DHL）或沙门菌志贺菌琼脂（SS）沙门菌志贺菌琼脂（SS）曙红亚甲蓝琼脂（EMB）或麦康凯琼脂对照培养基营养肉汤对照培养基四硫磺酸钠亮绿对照培养基（TTB）胆盐硫乳琼脂（DHL）或

3、沙门菌志贺菌琼脂（SS）对照培养基沙门菌志贺菌琼脂（SS）曙红亚甲蓝琼脂（EMB）或麦康凯琼脂对照培养基6、实验操作6.1、营养肉汤培养基：新鲜配制100ml/瓶的对照营养肉汤培养基3瓶，121℃灭菌15min，备用。取5支，分别接种乙型副伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌各1瓶，接种菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接种菌作为空白对照；被检培养基同法操作。置30～35℃，培养18h、48h，分别观察结果。6.2、四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）：新鲜配制10ml/支的对照TTB培养基，121℃灭菌15min，备用。临用前，无菌操作加入0.2ml碘试液和0

4、.1ml亮绿试液。取5支，分别接种乙型副伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌各2支，接种菌液1ml（不大于100cfu），另一支不接种菌作为空白对照；被检培养基同法操作。置30～35℃，培养18h、24h，分别观察结果。由于TTB中的碳酸钙对浑浊现象观察有影响，因此若浑浊现象不明显，则将各培养物接种至胆盐硫乳琼脂或沙门、志贺属琼脂平板上划线观察TTB培养物生长情况。6.3、胆盐硫乳琼脂（DHL）【或沙门菌志贺菌琼脂（SS）】：新鲜配制对照DHL或（SS）琼脂培养基，加热充分溶解，冷却至60℃倾注平皿，35℃培养箱预培8h后备用。取3个无菌DHL或（SS）琼脂平板，

5、涂布接种乙型副伤寒沙门菌2皿，接种菌液0.1ml（含菌50～100cfu），另一平板不接种菌作为空白对照，涂布均匀后于30～35℃倒置培养。被检培养基同法操作。18h、48h分别观察结果。6.4、曙红亚甲蓝琼脂（或麦康凯琼脂）培养基：新鲜配制对照曙红亚甲蓝琼脂（或麦康凯琼脂）培养基，121℃灭菌15min，冷却至60℃倾注平皿，35℃培养箱预培8h后备用。取5个无菌曙红亚甲蓝琼脂（或麦康凯琼脂）平板，分别涂布接种大肠埃希菌和乙型副伤寒沙门菌各2皿，接种液0.1ml（含菌50～100cfu），另一平板不接种作为空白对照，涂布均匀后于30～35℃倒置培养。被

6、检培养基同法操作。18h、24h分别观察结果。7、结果培养基验证菌株编号被检培养基对照培养基检查结果营养肉汤（30～35℃，18h、48h）乙型副伤寒沙门菌1金黄色葡萄球菌2空白3四硫磺酸钠亮绿培养基（TTB）（30～35℃，18h、24h）乙型副伤寒沙门菌12金黄色葡萄球菌34空白5胆盐硫乳琼脂（DHL）（30～35℃，18h、48h）乙型副伤寒沙门菌12空白3沙门菌志贺菌琼脂（SS）（30～35℃，18h、48h）乙型副伤寒沙门菌12空白3曙红亚甲蓝琼脂（EMB）（30～35℃，18h、24h）大肠埃希菌12乙型副伤寒沙门菌34空白5麦康凯琼脂（30

7、～35℃，18h、24h）大肠埃希菌12乙型副伤寒沙门菌34空白58、结论：从以上表格结果判断该培养基适用性检查规定。试验者：复核者：