抗链球菌溶血素o(aso) 免疫比浊法

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1、项目抗链球菌溶血素O（ASO）方法免疫比浊法目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3．试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4．仪器5．操作6．计算7．操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8．参考值9．临床意义附录A:参数1.检测原理660nm样本中ASO+包被SLO的胶乳-----------------大分子免疫复合物在660nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中ASO效价成正比。2.标本采集

2、与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂：最好

3、不要使用血浆检测，不使用抗凝剂。2.4标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清置洁净试管加盖2-8℃保存。3．试剂3.1试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司ASO试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：组成R1：缓冲液200mmol/L（PH=8.6）叠氮钠0.09%R2：包被SLO的胶乳2.5mg/dL叠氮钠0.09%3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定

4、标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为乳白色，当试剂变色或出现沉淀，按照试剂失效处理。多项免疫类标准液储存在2-8℃至标签所示失效日期。第一次开启后，不要冷冻。在2-8℃下将瓶盖拧紧保存，标准品可以储存长达6个星期的时间。4．仪器KONELAB30型号仪器。性能：波长660nm，仪器测定吸光度的

5、灵敏度应达到0.001ABS以上。5．操作样品为血清。本法为两点速率法。参数见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6．计算A测定C=————×C0A标准式中：c——测定血清ASO滴度，IU/mL；A测定——标本管吸光度；A标准——标准管吸光度；CO——校准液中ASO滴度，IU/mL；7．操作性能7.1精密度：批内CV<3.10%，批间CV<4.83%。7.2准确度：检测结果的相对不准确度≤±10%。7.3灵敏度：ASO滴度为：124U/mL时，比色吸光度变化率A660nm约0.

6、006-0.007/分钟。7.4可报告范围：血清与试剂用量之比为3:250:50时，测定上限为900IU/mL。7.5特异性：测量值在给定值的90%-110％范围内。7.6干扰：内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响。8．参考值成人：0-180IU/mL，儿童0-250IU/mL。9．临床意义链球菌溶血素O（SLO）是链球菌的一种胞外产物，它能溶解细胞膜从而导致溶血。抗链球菌溶血素（ASO）是SLO的抗体。ASO测试能为早期的链球菌所导致的感染提供证据，主要应用于急性风湿热、链球菌感染后的血管球性肾炎、患

7、有咽炎的个人以及其它急性感染。通常，与抗原对应的抗体在急性链球菌感染后三周左右达到峰值，并保持在峰值水平3-4个月，然后逐渐降低到正常水平。附录A:参数