补体c3 免疫比浊法

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1、项目补体C3方法免疫比浊法目录1．检测原理2．标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3．试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4．仪器5．操作6．计算7．操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8．参考值9．临床意义附录A:参数1.检测原理340nm样本中C3+试剂中的C3抗体-----------------大分子免疫复合物在340nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中C3含量成正比。2.标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12

2、h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。2.2静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。2.3抗凝剂：不使用抗凝剂。2.4标本处理：血标本室温放置30min～4

3、5min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。3．试剂3.1试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司C3试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：R1：PEG4缓冲剂：含高分子强化剂的磷酸盐缓冲剂。含有0.095%的叠氮化钠。R2：C3抗血清，含有0.095%的叠氮化钠。3.2：校准血清使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的多项免疫类标准液。其中包含C3定值。校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要

4、全点定标。3.3试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1颜色为无色，试剂R2颜色为无色至浅黄色，当试剂变色，按照试剂失效处理。多项免疫类标准液储存在2-8℃至标签所示失效日期。第一次开启后，不要冷冻。在2-8℃下将瓶盖拧紧保存，标准品可以储存长达6个星期的时间。4．仪器KONELAB30型号仪器。性能：波长340nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。5．操作样品为血清。本法为免疫比浊法。参数

5、见后附，附录A。试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。6．计算计算吸光度的差值（OD2－OD1），并建立标准液吸光度－浓度工作曲线。计算标本的吸光度差值，并在工作曲线上读取浓度值（mg/dL）。如标本的吸光度值大于标准液的最大值，则需稀释标本后，重新测量。7．操作性能7.1精密度：批内CV<2.01%，批间CV<3.14%。7.2准确度：检测结果的相对不准确度≤±10%。7.3灵敏度：补体C3浓度为72.0mg/dL时，显色吸光度A340约0.193～0.235。7.4可报告范围：血清与试剂用量之比为1:15

6、0时，测定下限为20mg/dL。7.5特异性：测量值在给定值的90%-110％范围内。7.6干扰：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。8．参考值75-135mg/dL9．临床意义补体C3是典型和替换补体的核心。它是补体C5转化酶的成分之一。C3的激化分裂的产品具有重要的生物功能。C3b是一种在免疫系统中起作用的调理素。C3a是一种补过敏毒素和化学毒素。C3水平的升高常见于急性发炎症状。其水平的降低常见于并发症（complexdisease）

7、，免疫系统因发热病菌引起的反复感染，多种肾小球肾炎（variousglomerulonephritides），和先天免疫缺陷（congenitaldeficiencies）。附录A:参数