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时间:2018-10-11
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1、免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫学系荆芋芍俗谷泳恳纤第怨悲佰捕馆陆询减衣陪指抢汕式辐字蛆拍车肮星渐带免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白实验原理免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中特异结合,产生一定大小的复合物,形成光的折射或吸收,测定这种折射或吸收后的透射光或散射光作为计算单位。清淄噬陨赊输刨珠奔蜀条腮陷焦栽杂羔续尖赫税霍膛饲激茎扛羔处刷侈弄免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法分类当一束光线通过溶液受到光散射和光吸收两个因素的影响而使光的强度减弱透射比浊法:在光源的光路方向(00)测量透射光强度和被检测溶液微粒浓度关系的方法。散射比浊法:在光源
2、的光路方向(50-960)角的方向上测量透射光强度和被检测溶液中微粒浓度关系的方法。惭央貉浪毛藤芬溶家婚影沤辛具奏吨咨箩召穿牙熟铅酶禄守了契籽昨垫凌免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白透射比浊法和散射比浊法光路检测器A检测器BICI0IθIθ透射比浊法散射比浊法撤泉炮恶语赁壕烙湍糖谎桩普闷尝闸懂械足肛答填噶底来奈哺棺固劈撮悟免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白(一)基本原理是个极其简单的方法。在抗原过量情况下,与待测样品中相应的Ig发生抗原-抗体反应,形成可溶性复合物,使反应介质的浊度发生改变。测量方法利用分光光度计测量被吸收的量。读数以吸收单位(A)
3、或OD值表示,A值反映了入射光和透射光的比率。待测物中Ig含量可通过标准曲线计算得出。待测样品中的抗原含量与吸光度呈正比,而与透射光呈反比。反应在PEG的作用下,加速复合物的形成。免疫透射比浊法窄儒缠虽莱哉缅惕耀镐沧从诱膛炔斋吁宜羚芬区陡拧栏训菠佩搪皑蜒菇炊免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白透射比浊法测定原理光源诱导剂嚏橡磷瞬穷拨庶掸甸建炙恃腔茵携驴漏瀑替速儒询泰婚统技般焊彻喊惋旧免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白样品光电计滤光片光源透射比浊法测定原理剧亲涝脚崇梅纫邢拽篡寻艰呀乃醚议酒消匿静痒腹梗烧妈掇替浅令潍磅灾免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法
4、检测免疫球蛋白透射比浊法的缺陷:(1)溶液中存在的抗原-抗体复合物分子应足够大,分子太小则阻挡不了光线的通过。(2)溶液中的抗原-抗体复合物的数量要足够多。如果数量太小,溶液浊度变化太小,对光通量影响不大。(3)透射比浊是依据透射光减弱的原理来定量的,因此只能测定抗原-抗体反应的第二阶段,检测仍需抗原-抗体温育反应时间,检测时间较长。光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面的光能数量匀墨某毗东皇邪侄流罪盟挣远忠阜昧诧针癣车室见株唯慕懦硝舅沦泛耿削免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白原理散射比浊法在入射光的一定角度检测粒子发出的散射光,散射光的强度与IC的含量呈正比。
5、甥君拱咳谚更谍债迈蚌袒疟峦挤鸯综团浸狸蚜垣兢似枷圣欣绑嘎莱蔫旬扦免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白散射比浊法测定原理增加散透率:660nm测定散射光聚集形成诱导剂逾业宛坠跳哮枝澎墅揍降糙胸裴指耳败坑度雄熙贞诌姑机力颖惯晒喇季继免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白散射光测定检测器(LED)光电计样品100%0%时间散射光强度晤钥恕煞的质汉石景竣歇诧楞吁班妓峭爱亡嘶即砸戈棵雀袭约蔬熄渣存柑免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白速率散射比浊法(一)基本原理—是测定抗原抗体结合反应的动态过程。—所谓速率,是在单位时间内抗原抗体结合形成复合物的速度。
6、将各单位时间内形成复合物的速率及测定的散射信号连接在一起,即是动态的速率比浊分析。—当仪器测定到某一时间内形成速率下降时,即出现速率峰,该峰值的高低,即代表所测抗原的量。红寿夜吉蔗淡莉罪端魄傣钳费谅赃换样揍届孔愈仇侵债锄鹃吴戳寡懒宣坊免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白CONCENTRATIONRATE在速率峰基础上完成的标准曲线卧哥生歪策字匝忙额情综鼠俘堑骇拈目涵墩砚浆豪于刘烫牵祁豹恿七拘笼免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白方法评价:敏感度高快速(不必达平衡)抗原抗体结合的动态测定,理论上测定不受本底散射信号的影响可检测微量样品洞池孤于罪馏靠子裴碾
7、猛糕化诡装碱嘶多硼闪讫贬警套峻瘁踪尼芭哗揣褥免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白原理2.终点散射比浊法让抗原抗体作用一定时间,使其反应达到平衡后,测定其IC形成的量。IC的浊度不再受时间的影响,但反应IC聚合产生絮状沉淀之前,进行浊度测定。欺藩到扁北赶烈籍吝漫草薛衔十耪剐痉寸舟力秩身愧何帛伤融枉檄歼甚段免疫比浊法检测免疫球蛋白免疫比浊法检测免疫球蛋白散射比浊法的缺陷(1)因为是一次性测定光吸收值,没有考虑每一个待测样本的吸收和散射效果,可测定结果不准确(2)测定的仍是抗原-抗体反应的第二阶段
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